脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株, 利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体, 转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1, 并对其脱硫性能进行了研究。结果表明, 在同样的生物催化脱硫反应条件下, 工程菌的脱硫活性达到6.25 mmol DBT/g dry cell/h, 是原始菌的2倍; 柴油的脱硫试验表明, 在12 h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8 mg/L降至100.1 mg/ L, 脱硫率达到68%, 而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性, 试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株, 并为该技术的应用提供了参考。     

血红蛋白基因在脱硫菌R-8中的表达及其在柴油脱硫中的应用

摘要：【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌（Pseudomonas delafieldii） R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌（Vitreoscilla）血红蛋白基因表达质粒并电击导入原始菌株,得到重组菌P. delafieldii R-8-2。【结果】R-8-2菌株的CO差光谱在419 nm处有特征峰出现,表明血红蛋白在脱硫菌中得到了有效表达。R-8-2菌株和R-8菌株相比,生长得到改善,相同培养条件下菌体密度比R-8提高了20%,最大脱硫活性能够达到R-8的2.4倍。在实际柴油脱硫实验中,R-8-2菌株能将柴油的硫含量降至96.6 mg/L,脱硫率达到69.9%,而R-8仅为57.2%。【结论】R-8-2是在较低溶氧条件下仍能保持较高的菌体密度和脱硫活性的基因工程菌株,具有良好的应用前景,该研究为血红蛋白基因在生物脱硫工业的应用提供参考。     

p53蛋白和MDR表型在白血病中的共表达研究

白血病的最重要的特征性耐药机制之一,是由P-糖蛋白(Pgp)和多药耐药相关蛋白(MRP)介导的多药耐药性(MDR)。除了Pgp和MRP之外,p53突变或失活可能在治疗失败中起一定作用。一些研究已经证明Pgp和MRP可能与突变或失活的p53蛋白的过表达相关联。本研究的目的是通过流式细胞术(FCM)分析p53表达与MDR功能表型之间的关联。采用流式细胞仪分析罗丹明123检测MDR功能表型。发现41例慢性粒细胞白血病(CML)中有18例(43.9%)为阳性,28例慢性淋巴细胞白血病(CLL)中有16例(54.1)为阳性,28例急性髓性白血病(AML)中有11例(39.3%)为阳性,22例急性淋巴细胞白血病(ALL)中有4例(18.2%)为阳性。在白血病细胞中观察到不同水平的p53表达:41例CML中有12例(29.2%),28例CLL中有9例(32.1%);28例AML中有15例(53.6%);22例ALL中有8例(36.4%)。本次研究中,在ALL、CLL和AML中未观察到p53表达与MDR功能表型之间的有显著关联。而在CML中观察到p53与MDR功能表型的共表达有显著关联(p=0.000 3)。在该疾病的加速期和,p53过表达更频繁地出现。研究结果表明MDR功能表型可能与白血病晚期p53突变有关。