卵泡的大小对猪卵母细胞体外生长和成熟的影响

卵泡的大小对猪卵母细胞体外生长和成熟的影响@刘瑞华$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @李永海$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @焦丽红$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @王红$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @王维华$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080…     

修饰的pfu酶与T7ssb蛋白在聚合酶链式反应中的应用

表达、纯化pfu-sso7d及T7ssb蛋白,并优化PCR反应体系。分别将pfu、pfu-sso7d及T7ssb基因构建于p ET28载体上,转化至原核细胞中,诱导表达出pfu、pfu-sso7d及T7ssb蛋白,并通过His-Nickle亲和层析纯化柱纯化蛋白。从A549细胞中提取人的基因组DNA,以该基因组DNA为模板,利用pfu酶扩增c-met基因;同时从A549中提取总RNA,经过逆转录反应后,以逆转录产物c DNA为模板,分别利用pfu酶和pfu-sso7d酶扩增PD-L1基因,对比两种酶的DNA扩增效率;从MC38细胞中提取鼠的基因组DNA,以此基因组DNA为模板,分别用pfu-sso7d和pfu-sso7d联合T7ssb蛋白扩增Trp53基因,对比两种PCR反应体系的扩增效率。我们成功的将pfu、pfu-sso7d及T7ssb基因构建于p ET28载体上,并成功的诱导表达并纯化了这三种蛋白;用pfu酶成功的扩增出c-met基因;对比pfu酶,pfu-sso7d表现出较高的DNA扩增效率;在扩增Trp53基因的PCR反应体系中,同单独使用pfu-sso7d酶相比,pfu-sso7d联合T7ssb蛋白在PCR反应体系中可以提高PCR产物的量,约1.7倍。本次研究表明,利用纯化的pfu-sso7d蛋白和T7ssb蛋白,我们构建了优化的PCR反应体系。     

面包“化石”三题

今天,被我们叫做面包的发酵食品,起源于西方,它的“娘家”在埃及。古埃及的面包“化石”大约在五千年以前,古埃及人发明了发酵食品。这是从空气里的细菌,偶然混入吃剩的面食里,起了发酵作用,使那些面食变得体积膨大而松软,由此,世界上就有了微生物食品——面包。这个事实,是从古面包“化石”中研究出来的。考古学上曾经证明了古代的面包样本,其中最著名的是古罗马时代的本贝伊城面包,这种古面包是在1862年出土的,曾由科学家加以     

生物芯片高效点样微悬臂梁探针的微细加工

生物芯片技术是 90年代初发展起来的一门新兴技术 ,将给 2 1世纪生命科学和医学研究带来一场革命。其中生物芯片中的微阵列分析最为关键 ,尤其受到人们的关注和研究。微阵列形成主要由各种探针接触式点样而得的。微机电系统(MEMS)的兴起和发展为点样探针的制备提供了简单而有效的微细加工技术。介绍了基于MEMS技术的SiO₂ 基微悬臂梁探针的设计和制备 ,并用这种探针进行Cy3标记链亲和素点样。结果表明这种微悬臂梁探针可以点样 2～3μm的样点 ,并且一次取样可以点样至少 3000个点,从而实现高价生物微阵列点样。     

EGF和17β-E_2对猪卵母细胞体外受精后发育能力的影响

EGF和17β-E_2对猪卵母细胞体外受精后发育能力的影响@李永海$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @刘瑞华$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @焦丽红$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @王红$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @王维华$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080…     

猪卵母细胞的体外受精及多精受精

对用于猪体外受精(IVF)的研究方法和技术,如传统的液滴IVF、透明带下注射精子受精(SUZI)、卵母细胞质内单精注射受精(ICSI)及细管IVF等进行了简述。与其它动物相比,进行猪卵的体外受精研究,多精受精现象特别明显。大量的研究表明,猪卵的多精受精不但与其品种特性有关,而且与卵母细胞成熟的程度、透明带的异常、受精时获能精子的浓度、输卵管分泌物、受精液蛋白添加成分、NaHCO3浓度、咖啡因、pH值以及温度等因素密切相关。     

生物滴滤法处理恶臭气体的填料选择

采用生物废气处理技术特别是生物滴滤法处理城市污水处理厂产生的主要的致臭物质(含硫化合物)既有效又经济,而其中填料的选择需要考虑填料的吸附特性、传质性能以及稳定性和经济性,保证系统的顺利运行。     

原核生物核糖核酸酶HII基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

核糖核酸酶HII (RNaseHII)能有效降解RNA和DNA杂交链中的RNA链。为进一步研究其功能 ,利用大肠杆菌XL1blue为模板 ,相应的寡聚脱氧核苷酸为引物 ,PCR扩增大肠杆菌RNaseHII(rnh 2 )基因 ,并将目的基因连接到克隆载体 pUC18上 ,经测序确认无误 ,分别亚克隆到能够进行IPTG诱导的表达载体pTrcHisC和进行温度诱导的表达载体pBV2 2 0上。重组质粒转化到大肠杆菌DH5α细胞中获得高效表达。在载体pTrcHisC和 pBV2 2 0中目的蛋白RNaseHII的表达量均超过菌体总蛋白的 2 0 % ,且表达产物以稳定的包涵体形式存在。此项工作为以后目的蛋白的纯化提供了有利条件 ,并为研究其结构和功能奠定了基础。