人类mTOR信号通路Ragulator复合物的各亚基的原核表达与纯化

Ragulator是mTOR信号通路中的一个关键蛋白复合物,分别由p18、p14、MP1、Lamtor4、Lamtor5五个蛋白通过相互作用复合而成。Ragulator在mTOR通路中起到结合Rag GTPases并锚定到溶酶体表面的作用,而后者招募并激活mTORC1。本研究通过生物信息学和分子克隆相结合的手段,构建各组分蛋白全长的质粒以及截短p18(41~161)和Lamtor(83~173)片段,相应转化到大肠杆菌中进行蛋白的表达。使用Ni~(2+)柱亲和层析,阴离子交换层析和快速蛋白液相色谱相结合的蛋白纯化手段得到纯度较高的稳定的Ragulator复合物,为后续的晶体制备和生物学结构奠定了基础。同时也为进一步深入了解该信号通路的机制以及相关药物的开发与研究作出了贡献。     

右美托咪定联合帕瑞昔布钠对老年腹腔镜胃癌手术患者应激反应、细胞免疫功能和认知功能的影响

摘要 目的：探讨帕瑞昔布钠和右美托咪定联合麻醉对老年腹腔镜胃癌手术患者细胞免疫功能、应激反应和认知功能的影响。方法：纳入2019年8月~2022年7月期间西安交通大学第二附属医院收治的150例老年腹腔镜胃癌手术患者。按照随机数字表法将患者分为帕瑞昔布钠组（n=50,帕瑞昔布钠）、右美托咪定组（n=50,右美托咪定）和联合组（n=50,右美托咪定联合帕瑞昔布钠）。对比三组临床指标、视觉模拟评分法（VAS）、简易精神状态检查表（MMSE）评分、术后认知功能障碍（POCD）发生率、应激反应指标[皮质醇（Cor）、肾上腺素（E）、促肾上腺皮质激素（ACTH）]、细胞免疫功能变化情况。结果：联合组的术后住院天数、肛门排气时间短于右美托咪定组、帕瑞昔布钠组（P<0.05）。联合组术后12 h、术后24 h、术后48 h VAS评分低于右美托咪定组、帕瑞昔布钠组（P<0.05）。联合组术后24 h、术后72 h MMSE评分高于右美托咪定组、帕瑞昔布钠组（P<0.05）。联合组的POCD发生率低于右美托咪定组、帕瑞昔布钠组（P<0.05）。三组术后1 d Cor、E、ACTH升高,但联合组低于帕瑞昔布钠组、右美托咪定组同期（P<0.05）。三组术后1 d CD8⁺升高,但联合组低于帕瑞昔布钠组、右美托咪定组同期;CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺CD8⁺下降,但联合组高于帕瑞昔布钠组、右美托咪定组同期（P<0.05）。结论：右美托咪定联合帕瑞昔布钠应用于老年腹腔镜胃癌手术患者,镇痛效果显著,可减轻机体的应激反应、免疫抑制及对认知功能的损害。