亚洲棉GAE6-3A上游序列的分离及其在烟草中的表达

根据E6基因保守域设计引物 ,PCR扩增出亚洲棉 (GossypiumarboreumL .)GAE6基因长约 40 0bp片段 ,序列分析表明该片段与海岛棉 (G .barbadense)E6基因同源性达 96 .8%。进一步合成 2个反向引物协助进行PCR 96孔板筛库分离到亚洲棉GAE6 3A克隆。酶切鉴定其插入片段长约 8.0kb ,序列测定及分析结果表明其上游长约 1.5kb。将GAE6 3A上游序列克隆至含有内含子的GUS基因前 ,构建了植物表达载体。三亲杂交后农杆菌介导转化烟草 ,组织化学分析显示GUS基因在转基因烟草植株的根、茎、叶的表皮 (包括表皮毛 )及维管组织表达较强     

Specific expression of a β-tubulin gene (GhTub1) in developing cotton fibers Specific expression of a b-tubulin gene (GhTub1) in developing cotton fibers

Eukaryotic microtubular cytoskeleton plays crucial roles in various cellular processes, in-cluding cell division, polar cell expansion and cell differentiation[1, 2]. The basic filament-forming unit of microtubules is a heterodimer protein composed of a-tubulin and b-tubulin polypeptides. In the higher plants studied, both a- and b-tubulin genes form multigene families. While some of these tubulin genes are expressed constitutively, many others exhibit tissue-, organ- or cell type-specific exp…     

棉花微管蛋白基因GhTub1在纤维细胞中的特异表达

以陆地棉(Gossypium hirsutum )纤维发育前期和中期的胚珠及纤维细胞为材料构建cDNA文库, 通过ESTs分析获得了一个β-微管蛋白家族成员(GhTub1). 以该cDNA的3′-UTR为探针, 利用Northern杂交方法, 对GhTub1基因在棉花不同器官及棉纤维不同发育阶段的表达进行了分析, 发现该基因的表达具有棉纤维细胞特异性. 在纤维发育过程中, GhTub1转录产物的累积主要发生在纤维细胞延伸阶段, 在纤维延伸速度最快时达到高峰. 利用裂殖酵母系统, 对GhTub1的细胞内功能进行了初步分析, 发现该基因在酵母中过量表达能使其细胞显著伸长或分支. 这些实验结果暗示GhTub1基因可能在纤维细胞的极性延伸中具有功能.     

棉花li突变体生长素极性运输的减弱

陆地棉(Gossypium hirsutum L.)li突变体叶片卷曲,植株扭曲,种子表皮毛明显偏短。通过扫描电子显微镜(SEM)观察发现,li突变体的纤维发育在起始期与野生型植株并无明显差异,但在伸长期开始后,如开花后3d(3 day post anthesis,DPA),纤维伸长受阻;li突变体茎的形成层和韧皮部分化发育不完全,生长素由顶端向基部的极性运输能力下降,仅为野生型植株的大约三分之一。推测棉花li突变体包括纤维发育不良在内的多效性异常表型,与其生长素极性运输能力的下降有关。     

陆地棉徐-142种子无毛突变体的比较研究

应用陆地棉徐-142及其种子无短绒无长绒突变体(fl),对棉纤维的发育作了初步研究.扫描电子显微镜观察发现,fl突变体开花当天的胚珠基本没有突起,导致种子无毛.RT-PCR分析表明,在纤维起始期和延长期,野生型胚珠中E6和Expansin基因转录水平高,开花15d(DPA)前后达峰值,而在突变体胚珠中两个基因在整个发育期只有极低的表达.Cotmyb A是棉花Myb家族的一个成员,该基因在野生型胚珠发育过程中明显表达,但在fl胚珠中表达异常.在BT培养基中加入GA3,或IAA和GA3,可使离体fl胚珠部分地恢复纤维发生和生长的能力.此外,外源激素对培养的WT和fl胚珠中E6和Expansin基因表达的影响相似,而对Cotmyb A基因的转录几乎没有影响(这一点WT和fl胚珠也相似).结果提示,fl种子中E6,Expansin和CotmybA基因异常或极低水平的表达与种子无毛有关,产生这些异常的原因有待深入研究.