人胸膜间皮细胞的分离和培养

利用两种取材方法建立人胸膜间皮细胞(HPMC)体外培养模型,一是用胰蛋白酶-EDTA消化法,从人肺脏胸膜及壁胸膜上分离胸膜间皮细胞;二是从胸腔积液中分离胸膜间皮细胞;进行胸膜间皮细胞的培养。用形态学和免疫组化S-P法对培养所得细胞进行鉴定。光镜下可见细胞汇合后呈多角形铺路石样,电镜下可见丰富的微绒毛和内质网,免疫组化染色结果显示表达角蛋白、波形蛋白,而抗VIII因子相关单克隆抗体、抗人白细胞CD45表达阴性;证实为人的胸膜间皮细胞。两种取材方法均可以成功建立间皮细胞体外培养模型,方法学上均有可行性;手术标本所得细胞有较高的细胞纯度,取材上胸腔积液更易于得到。     

某医院2007年至2009年医院感染不动杆菌属耐药调查分析

目的了解医院感染不动杆菌属细菌对临床常用抗菌药物耐药现状。方法对2007年至2009年852例不动杆菌属医院感染病例进行回顾性调查及耐药情况统计。结果不动杆菌属主要来源于痰液(60%)和血液(8%)标本,3年间17种抗生素耐药水平差异均有统计学意义;852株不动杆菌属对17种抗菌药物总耐药率:头孢哌酮/舒巴坦35.13%、亚胺培南/西司他丁46.4%、美罗培南51.0%、阿米卡星64.7%、四环素66.7%、左氧氟沙星67.1%、替卡西林/克拉维酸67.8%、环丙沙星68.0%、头孢吡肟68.7%、哌拉西林/他唑巴坦70.1%、头孢他啶70.5%、头孢曲松71.6%、头孢噻肟72.8%、庆大霉素73.5%、哌拉西林73.8%、复方新诺明77.3%和头孢哌酮86.8%。结论不动杆菌属细菌对临床常用抗菌药物耐药现象严重,仅头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南/西司他丁、美罗培南保持相对高的抗菌活性。     

人胸膜间皮细胞水通道蛋白1～10 mRNA的表达

体外培养人胸膜间皮细胞(HPMC),检测人胸膜间皮细胞水通道蛋白1～10mRNA的表达,探讨其在胸腔内液体平衡中的意义.从胸腔积液中分离人胸膜间皮细胞,进行培养,用形态学和免疫组化染色进行细胞鉴定.用RT-PCR检测水通道蛋白1～10(AQP1～10)mRNA在人胸膜间皮细胞上的表达.成功建立人胸膜间皮细胞体外培养模型,鉴定证实为间皮细胞,人胸膜间皮细胞上AQP1～10mRNA均有表达,AQP1、AQP9、AQP10表达丰富.人胸膜间皮细胞存在AQP1～10mRNA的表达,结合已知水通道蛋白的功能,证实人胸膜间皮细胞参于胸腔内液体转运.