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绿色荧光蛋白基因mRNA反义寡核苷酸的筛选和应用 总被引:1,自引:0,他引:1
基因mRNA的靶点筛选是设计反义寡核苷酸的关键.建立了PARASS(polyAanchoredRNAaccessiblesitesscreening)方法,即通过在mRNA末端引入polyA,与生物素标记的polyT退火结合,将其同链亲和素磁珠混合,使mRNA通过3’末端得到固定,保持mRNA的自然伸展和折叠,与寡核苷酸文库杂交筛选mRNA的结合靶点.PARASS筛选获得了绿色荧光蛋白(GFP)mRNA的3个反义寡核苷酸结合靶点,据其设计了多条反义寡核苷酸,与对照组相比,体外RNaseH分析显示3个靶点均为有效,在HeLa细胞内针对靶点的反义寡核苷酸能抑制GFP的表达,得到了Northern印迹结果支持.PARASS对反义寡核苷酸药物设计具有应用价值. 相似文献
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目的:探讨胸腺因子对老龄雄性大鼠氧自由基及抗氧化剂的作用。方法:18只21月龄老龄鼠随机分2组。一组隔日皮下注射胸腺因子D(TFD)2mg.kg^-13个月,另一老龄组和9只6月龄幼龄组作对照,注射等体积生理盐水3个月;3个月后,眼眶采血,分离血清检测。结果:老龄雄性大鼠与幼龄鼠比较,MT无变化,NO降低,LPO升高,SOD和CAT降低;TFD处理后,这种老年性改变可得到改善,并接近幼龄对照组水平;这种逆转除NO外都发生在9Am和/或8Pm。结论;胸腺因子可能对延缓衰老有益,其机制可能与胸腺-神经-内分泌-免疫-自由基网络有关。使用TFD以白天为宜。 相似文献
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