嗜热古菌S.solfataricus小热激蛋白基因的克隆及表达

目的:从嗜热古菌Sulfolobus solfataricus中克隆一种新的小热激蛋白SsHsp14.1的基因,并研究其表达和生物活性。方法:用PCR技术以S.solfataricus基因组为模板扩增得到目的基因序列片段,并将其克隆到pET-28a(+)中,转化到E coli BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,纯化后对产物进行生物活性测定。结果:从菌株S.solfataricus中克隆出目的基因,该基因的编码框由375个碱基组成,编码的蛋白质由124个氨基酸组成。含该质粒的大肠杆菌经诱导表达了一个与预期理论值相符的约14kDa的蛋白,利用亲和层析和凝胶柱分离纯化了重组蛋白。试验证明纯化后的重组SsHsp14.1具有分子伴侣活性,重组蛋白在体内表达时能提高E.coli细胞的耐热性。结论:成功克隆SsHsp14.1基因并表达出蛋白,并明确了其分子伴侣活性,为该热激蛋白的研究和应用奠定基础。     

白黎芦醇和香青兰总黄酮抑制哮喘小鼠TNF-α和IL-6的释放

为研究白藜芦醇和香青兰总黄酮对哮喘小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6 (IL-6)水平的影响,本研究采用卵清蛋白致敏来建立小鼠哮喘模型,给予白藜芦醇和香青兰总黄酮干预后,采用ELISA法检测小鼠BALF中TNF-α和IL-6的含量。结果显示,95 mg·kg^-1·d^-1的白藜芦醇和香青兰总黄酮均可降低哮喘小鼠BALF中的TNF-α和IL-6;95 mg·kg^-1·d^-1的白藜芦醇和香青兰总黄酮对小鼠体重有影响。本研究表明,白藜芦醇和香青兰总黄酮对哮喘炎症因子TNF-α和IL-6的释放具有一定抑制作用。