排序方式: 共有2条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1
1.
用λZAP Express作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库 总被引:3,自引:0,他引:3
采用QuickPrep micro mRNA Purification 试剂盒从新鲜金针菇子实体中快速提取、纯化mRNA,Time Saver cDNA Synthesis试剂盒逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加上EcoRⅠ/NotⅠ接头,在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAP Express Predigested Vector连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coli XL1-Blue MRF'构建成表达cDNA文库.经检测文库滴度为4.0×106 pfu/ml,文库扩增后,滴度达2.0×1010 pfu/ml,重组率为90%,cDNA分子长度在0.3-3.5 Kb范围.应用原位免疫杂交,初步筛选出火菇素相关基因的阳性克隆. 相似文献
2.
火菇素提取新工艺及其生物活性测定 总被引:1,自引:0,他引:1
火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白 ,从金针菇中分离纯化火菇素的改进工艺为 :金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后 ,通过DEAE SephadexA 5 0除去色素和部分杂蛋白 ,最后经CM SephadexC 5 0离子交换柱层析处理 ,得到了电泳均一的纯化蛋白 ,用微量透析法得到结晶 .理化性质研究结果表明火菇素为分子量 2 370 0 ,等电点pI 8 9,不含糖的简单蛋白 ,最大吸收波长λmax在 2 76~ 2 78nm ,最小吸收波长λmin在 2 5 0nm ,氨基酸组成不含蛋氨酸 .纯化产物对实验动物移植肿瘤的抑瘤作用实验的研究指出 ,火菇素对小鼠肉瘤S180 和艾氏腹水瘤有明显的抑制作用 ,且能延长小鼠的生存期 .毒性实验研究表明 ,未发现有明显的毒副作用 相似文献
1