体外共培养模式下神经干细胞对视网膜小胶质细胞生物学功能的影响

目的:通过构建体外共培养体系,探讨神经干细胞(NSCs)对脂多糖(LPS)活化后的视网膜小胶质细胞(RMG)生物学功能的影响及TIMP1/MMP9途径在其中的可能作用。方法:采用振荡分离法获取C57/BL6小鼠原代RMG,通过免疫荧光技术检测细胞Iba1的表达对其进行鉴定。采用含有LPS的培养基(终浓度为1μg·mL~(-1))刺激RMG 24h后,将其分为LPS对照组、NSCs组、TB-NSCs组,其中NSCs组将RMG与NSCs共培养24 h,TB-NSCs组将RMG与用中和性抗体封闭TIMP1的NSCs共培养24h;同时,未予以LPS刺激的RMG作为空白对照组。采用免疫荧光技术检测各组RMG的Ki67表达情况,观察其增殖能力;TUNEL技术检测各组RMG凋亡情况;ELISA方法检测各组RMG上清液中TNF-α、IL~(-1)β的蛋白质量浓度。结果:采用振荡分离法获取的原代RMG经免疫荧光染色鉴定Iba1呈阳性。NSCs组Ki67阳性率较LPS对照组降低(P0.05),而TB-NSCs组Ki67阳性率较NSCs组升高(P0.05)。NSCs组TUNEL阳性率较LPS对照组明显升高(P0.05),而TB-NSCs组TUNEL阳性率与NSCs组间差异无统计学意义(P0.05)。空白对照组、LPS对照组、NSCs组、TB-NSCs组RMG上清液中TNF-α蛋白质量浓度分别为(2.10±0.65)、(25.69±2.01)、(20.01±1.63)、(23.76±1.45)ng·mL~(-1),总体比较差异显著(FTNF-α=302.65,PTNF-α0.05);IL~(-1)β蛋白质量浓度分别为(1.77±0.74)、(15.38±1.18)、(10.88±0.95)、(13.45±1.41)ng·mL~(-1),总体比较差异非常显著(FIL~(-1)β=179.84,PIL~(-1)β0.05);其中,NSCs组TNF-α及IL~(-1)β蛋白质量浓度均较LPS对照组显著降低(P0.05),TB-NSCs组TNF-α及IL~(-1)β蛋白质量浓度较NSCs组明显升高(P0.05)。结论:体外共培养模式下,NSCs可抑制RMG增殖能力,提高其凋亡水平,并抑制其分泌促炎因子TNF-α及IL~(-1)β,该效应可能与调控TIMP1/MMP9相关。     

新月弯孢霉致角膜溃疡1例

报道1例由新月弯孢菌感染引起的角膜溃疡.患者女,42岁.右眼反复红肿、疼痛、伴视力下降长达7a,曾在某院眼科中心诊断为“真菌性角膜炎并穿孔”,给予药物治疗后病情好转,但上述症状反复多次出现,并逐渐加重,视力严重下降,为求进一步诊治来我院就诊,行右眼穿透性角膜移植＋前房成形术,手术顺利,无手术并发症.术后15个月再次出现眼红、眼痛,眼角膜刮片镜检可见宽大分隔菌丝、培养为新月弯孢菌.予抗真菌治疗,病情好转出院.