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目的克隆人RHD基因,并对其进行鉴定。方法以RhD阳性志愿者骨髓为材料,用TRIzol试剂提取总RNA;设计、合成人RHD基因扩增引物,RT-PCR方法扩增RHD基因片段;T/A克隆后将其亚克隆人pET28a(+)载体中,经酶切、PCR和测序对重组质粒进行鉴定。结果骨髓总RNA被成功提取;RT-PCR成功扩增出RHD基因片段,其大小与预期约509bp基本一致;T/A克隆后再将其亚克隆,通过酶切和PCR证明RHD基因成功亚克隆入pET28a(+)载体中;基因测序结果比对显示,与已公布的RHD基因(GenBank登录号为NM016124)序列基本一致,同源性为98%。结论成功克隆了RHD基因,这将为进一步研究奠定基础。 相似文献
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