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禽病原性大肠杆菌1型菌毛的分离与鉴定 总被引:4,自引:1,他引:4
以旋涡混合法使禽病原性大肠杆菌分离株566、1794和TK3菌毛脱落,经硫酸铵沉淀、透析后进行蔗糖密度梯度离心,收集密度为110至115g/cm3的蛋白带,经SDSPAGE测定,3株菌菌毛蛋白的分子量分别在175、170和170kD;提纯菌毛保留了甘露糖敏感性凝集豚鼠红细胞的能力,证明它们为1型菌毛;从1794株提取的1型菌毛免疫BALB/C小鼠产生的高免血清在Western blot中与3个菌株的相应菌毛蛋白均呈阳性反应。上述结果表明,受检的3株禽病原性大肠杆菌均表达了1型菌毛,其分子量在175~170kD之间,3个菌株的1型菌毛间具有较强的抗原相关性。 相似文献
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通过直接凝集试验、免疫荧光试验、SDS-PAGE和Western印迹,对一株猪源性大肠杆菌的粘附素进行了研究.结果表明,该菌株是一株同时表达987P和F_(41)两种粘附素抗原的猪源性大肠杆菌. 相似文献
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我国部分地区禽源性大肠杆菌的外膜蛋白型 总被引:13,自引:0,他引:13
测定了从我国18个省、市、自治区分离到的204个禽病原性大肠杆菌优势血清型分离株的外膜蛋白型(OuterMembraneProteinPaterns,OMP型)。这些分离株共产生了4个OMP型,56个O18分离株可分为3个OMP型,54个O78分离株、28个O2分离株、26个O88分离株、22个O11分离株和18个O26分离株,分别出现了4、2、1、3和1个OMP型。其中,OMP1型为6个血清型所共有,OMP3型则同时存在于O18、O78、O2和O11分离株中。结果表明,优势血清型中,O18、O78、O2和O11分离株具有多样性的OMP型,而O88、O26分离株的OMP型则高度一致,所测6个优势血清型的分离株间存在共同的OMP型 相似文献
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对江苏省25个禽源性大肠杆菌O_1、O_2和O_(78)分离株的外膜蛋白型进行了测定。用改良的N-十二烷酰肌氨酸法提取其外膜蛋白,经SDS-PAGE电泳后,用考马斯亮蓝法进行染色。结果,8个O_1分离株,9个O_2分离株分属2个OMP型,其中的1个为二者所共有;而8个O_(78)分离株的OMP型也与该型相同。表明从江苏省分离到的禽源性大肠杆菌具有多样性的OMP型,而且这3个血清型的分离株中存在着共同的OMP型。 相似文献
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共表达H9亚型禽流行性感冒病毒血凝素基因和鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力 总被引:13,自引:0,他引:13
为了构建更为安全有效的抗低致病性H9亚型禽流行性感冒(流感)的基因工程疫苗,将包含有H9亚型禽流感病毒分离株的血凝素(HA)基因、鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)全长cDNA序列及调控其转录的鸡痘病毒早晚期启动子(PE/L)的基因片段,定向插入鸡痘病毒转移载体1175的痘苗病毒启动子P7.5的下游,得到HA和IFN-Ⅱ基因分别处于P7.5及PE/L转录调控下的重组转移载体1175HAIFN。以脂质体转染法将1175HAIFN转染至已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡胚成纤维细胞(CEF)中。1175HAIFN与wt-FPV基因组DNA之间的同源重组产生了重组鸡痘病毒rFPV-HA-IFN-Ⅱ。通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀获得并纯化rFPV-HA-IFN-Ⅱ。以间接免疫[荧光法和细胞病变抑制试验证实,纯化的rFPV-HA-IFN-Ⅱ感染的CEF能以非融合的方式同时表达HA和具有抗HSV活性的鸡IFN-Ⅱ。动物试验表明,rFPV-HA-IFN-Ⅱ能显著抑制静脉攻毒后1日龄SPF鸡及含抗FPV母源抗体的商品鸡从泄殖腔排毒,且能减轻单表达HA的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)抑制日龄SPF雏鸡增重的副作用。 相似文献
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我国部分地区H9亚型禽流感病毒血凝素基因序列比较与遗传发生关系分析 总被引:20,自引:3,他引:20
为从分子水平掌握我国H9亚型AIV的遗传变异情况和流行规律,本研究汇集近年来从我国12个省、市、自治区的发病鸡群中分离到的23株H9亚型禽流感病毒,通过RT-PCR方法和核苷酸序列测定获得了23个毒株的HA基因cDNA核苷酸序列。核苷酸和推导的氨基酸序列同源性比较结果表明,这些毒株HA基因的核苷酸序列同源性为94.1%~100%,氨基酸序列同源性为95.4%~100%;将这23个毒株和来自亚洲及世界其它地区的另外31株的HA基因cDNA序列同源性进行比较发现,分离自香港的HK170499株与日本的2个毒株关系较近;氨基酸序列分析发现,CKGS199、CKTJ196、CKTJ296、CKSH300和CKBJ197五个毒株各发生了一个潜在的糖基化位点的丢失。54株H9亚型AIVHA基因55bp~1152bp的氨基酸序列分析发现,裂解位点尽管有10种基序,但本研究中的23株和近年来从我国大陆和香港地区的分离的毒株则均为RSSR↓GLF;构成受体结合位点的191位氨基酸有一个规律,即所有中国大陆毒株与部分香港毒株都为N,其它毒株均为H,141aa~143aa处的糖基化位点有与191aa类似的规律,即:凡是191aa为N的毒株,该处均为NVS(CKBJ194除外),凡是191aa为H的毒株,则该处均为NVT;遗传发生关系分析,中国大陆毒株处于欧亚谱系的第一支。本研究结果表明近年来我国鸡群中H9N2亚型禽流感病毒的感染流行可能有一个共同的来源,这为制定防治该亚型禽流感流行的有效对策提供了重要的科学依据。 相似文献
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鹅源新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因的序列分析 总被引:10,自引:1,他引:10
Six isolates of Newcastle disease virus were derived from south and east China regions during the disease outbreaks called "avian paramyxovirus infection of geese" or "geese paramyxovirus infection",and partial sequence analysis of hemagglutinin-neuraminidase(HN) gene was carried out to identify the genetic characteristics of these goose isolatesA 1905 nucleotide portion of HN gene of each of the 6 isolates was sequenced,the results revealed that the coding region of their HN genes are all 1716 nucleotides in length,which can encode 571 amino acid residues aloneThe coding region is followed by a noncoding sequence of 189 nucleotidesThough they diverged only 08%-37% from each other in the nucleotide sequences of coding region,they differed by 175%-179% to F48E8, a standard challenge strain of chicken originCysteine residues are well conserved throughout the amino acid sequences,while the number of the potential glycosylation sites varys from 4 to 6Residue positions Thr 48,His 54,Ser 77,Ala 266,His 340 and Lys 384 are also highly conserved in the 6 goose isolatesThe corresponding residues in other NDV strains are commonly Met 48,Ser 54,Asn 77,Ile 266,Tyr 340 and Glu 384However,the sequences of receptor-binding related regions show no difference to the 14 reference strains from domestic or abroad 相似文献
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在疫苗免疫选择压力下H9N2亚型禽流行性感冒病毒HA基因的遗传变异 总被引:9,自引:0,他引:9
为了解H9N2亚型禽流行性感冒(流感)病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况,对某鸡场的感染鸡群进行连续4年的跟踪监测,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析.结果表明,在使用第一次分离的病毒株制备的疫苗后8个月分离到的病毒株,其HA基因仅发生一个氨基酸的差异;但在继续使用该疫苗的第二个和第三个年头分离的病毒株,它们的HA基因则一直在发生较大的变化.这一发现对进一步研究禽流感病毒在不断使用疫苗的选择压力下发生变异的规律,指导制定正确的禽流感防制对策具有重要意义. 相似文献