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目的:为了在转基因鸭梨植株中有效抑制转录后α-法尼烯合成酶基因(PFS)的表达,研究了α-法尼烯合成酶基因双链RNAi载体的构建。方法:利用RT—PCR技术,从鸭梨的果皮中获得了来源于PFS编码区的2个基因片段,反向连接,构建成RNAi载体。结果:经PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,所构建的载体其序列与设计相一致。结论:克隆质粒pMD-L-S构建成功,为借助农杆菌介导法将PFS基因转化到鸭梨再生植株中奠定了基础。  相似文献   
2.
苹果α-法尼烯合成酶基因双链RNAi载体的构建   总被引:1,自引:0,他引:1  
RNA干扰属于转录后后基因基因沉默机制(PTGS),是一种新型的基因沉默手段,用于基因表达和功能的研究。以成熟苹果的果皮RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆α-Farnesene合成酶基因(AFS),设计特异引物从AFS基因中扩增515bp和396bp的反义和正义基因片段,将正义和反义基因片段串联,把构成的长为911bp的DNA插到PBI121表达载体中,构建成可表达α-Farnesene合成酶双链RNA载体PBI-AFS。  相似文献   
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