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重叠延伸PCR法构建小鼠Sumf1基因的定点突变真核表达载体 总被引:4,自引:0,他引:4
前期通过染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)筛选出了转录因子activator protein.2 alpha(AP-2α)的靶基因Sumf1.采用重叠延伸PCR定点诱变技术,对AP.2α在Sumf1内含子片段上的两个结合位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体.DNA测序表明,Sumf1内含子片段103—111bp,411~419bp两处的碱基已分别由GCCGTCAGG突变为GAAGTCCTG,由GCCTCTAGG突变为GGATCTCTG,成功实现定点诱变,为进一步研究AP-2α对基因Sumf1的表达调控奠定了基础. 相似文献
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