一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究

Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中"友好位点"的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1 070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据.     

诃子瘤蛾——中国新记录

诃子瘤蛾和Sarbena lignifera Walker,属鳞翅目瘤蛾科(Nolidae),在我国尚为首次记录。幼虫食叶,是我国热带、亚热带地区诃子、使君子等药用植物的重要害虫。现将近年在本所海南岛兴隆药物站对该虫的初步研究结结果报道如下。 形态特征 雌性 成虫体长8～10毫米,翅展21～23毫米。头、胸、腹灰褐色,头部位置低下,从背面看不到头,一对领片向前突伸,肩片则紧贴于体背。触角丝状,褐色,具灰白色细绒毛,复眼及下唇须深褐色,足褐色;中足胫节有