β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达

【目的】β-甘露聚糖酶和木聚糖酶都属于半纤维素酶,它们已经同时运用于工农业生产的许多领域。构建β-甘露聚糖酶和木聚糖酶共表达菌株并进行相关评价。【方法】通过设计一个共同的酶切位点,将菌株Bacillus subtilis BE-91中的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因串联到表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌构建了一株能够共表达β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的菌株B.pET28a-man-xyl。【结果】菌株诱导21 h后,发酵液中β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的酶活分别为713.34 U/mL和1455.83 U/mL,是胞内酶活的11.8倍和2.53倍。【结论】SDS-PAGE分析、水解圈活性检测和胞外酶与胞内酶酶活检测表明:两个酶均以功能蛋白独立分泌到胞外。此外,与β-甘露聚糖酶和木聚糖酶单独酶解半纤维素相比,复合酶的酶解效果更好。菌株的成功构建为复合酶制剂(半纤维素酶制剂)的研究和生产奠定基础。     

2种方法提取绒毛香茶菜精油成分及体外抗氧化能力的比较研究

分别采用微波辅助水蒸气蒸馏法和超声波辅助水蒸气蒸馏法,从新鲜的绒毛香茶菜叶片中提取精油,用GC-MS对精油化学成分进行测定,且对比了2种不同方法提取的精油对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基的清除能力。结果表明:微波辅助水蒸气蒸馏法优于超声波辅助水蒸气蒸馏法,提取率达到0.56%。绒毛香茶菜精油主要成分为烯烃类及酮类,2种方法提取的绒毛香茶菜精油成分中,4-羟基-4-甲基-2-戊酮最多(相对含量在23.23%～42.53%之间),其次是α-萜品烯、萜品油烯、双戊烯和D-柠檬烯。在不同的抗氧化能力评价体系中证实,2种方法提取的绒毛香茶菜精油在(200～1 000)μg/mL浓度梯度范围内均有较强的抗氧化活性,且与精油浓度梯度成正相关。综上所述,2种提取法所得绒毛香茶菜精油的提取率、成分、含量及抗氧化活性等方面均存在一定差异,为绒毛香茶菜精油的深入研究提供了理论基础。     

小白及多糖提取、脱蛋白工艺及抗氧化性研究

本研究探讨了小白及多糖提取、脱蛋白工艺及其抗氧化性。以粗多糖提取率为指标,在单因素实验的基础上进行正交试验,探讨微波额定功率百分比、微波时间、浸提温度、浸提时间对粗多糖提取率的影响,得到最佳提取工艺参数:微波功率为额定功率的40%,微波时间60 s,浸提温度70℃,浸提时间2.5 h,在此条件下小白及多糖的得率为38.33%。脱蛋白实验结果显示:酶-Sevag法脱蛋白效果最好,其蛋白质脱除率为80.01%,多糖损失率为24.58%。比较小白及多糖的抗氧化性,得出酶制小白及多糖和小白及粗多糖对DPPH自由基、O■有较好的清除能力,其IC_(50)值分别为24.855、28.948μg/mL,0.212、0.223 mg/mL。研究结果为小白及等药用植物多糖的提取及综合利用提供借鉴。     

云南9种悬钩子属植物果实品质比较与综合评价

目的：对云南9种野生悬钩子果实品质进行初步测定与分析，筛选出果实品质较好的悬钩子种质。方法：以云南省9种野生悬钩子属植物果实为材料，测定果实的横径、纵径、果形、果色和8种营养成分等指标，并运用多重比较、主成分分析和隶属函数等方法，对野生悬钩子果实品质进行综合评价。结果：不同悬钩子果实表型和营养成分存在显著差异；主成分分析将果实表型和营养成分指标简化为四个主成分，可解释所有变量原始信息的85.643%；采用隶属函数法确定权重，结合主成分分析，构建了悬钩子果实品质综合评分模型，并对9种悬钩子果实品质进行综合评价，得分排序为：光滑悬钩子>红泡刺藤>桔红悬钩子>大乌泡>高粱泡>插田泡>掌叶悬钩子>栽秧泡>红毛悬钩子。研究筛选出两份果实品质相对较好的种质资源，分别为光滑悬钩子和红泡刺藤。结论：光滑悬钩子的果实纵、横径和果重最大，蛋白质、氨基酸和有机酸含量较低，总黄酮含量最高；红泡刺藤果实横径和果重较大，总糖、花色苷、总酚含量极显著高于其他所有悬钩子，总黄酮含量较高且有机酸含量较低。在今后的驯化栽培时，可优先选择光滑悬钩子和红泡刺藤。