AS2O3抑制人结肠癌生长的体内外实验研究

目的：通过研究三氧化二砷（AS2O3）对人结肠癌细胞株LS-174T在体内外实验中增殖情况的影响,探讨As2O3治疗结肠癌的机制。方法：1、试验分组：体外细胞培养及体内动物实验均分三组：对照组,As2O3低剂量组,As2O3高剂量组。2、MTT法测定细胞增殖数的情况。3、丫啶橙/溴乙啶（AO/EB）双荧光染色检测细胞凋亡率。4、免疫组织化学法测定结肠癌细胞和裸鼠实体肿瘤中HIF-1α和VEGF的表达。5、测量各组裸鼠实体肿瘤的重量及体积。结果：体外试验中,由MTT法可以看出,As2O3治疗组细胞生存率明显低于对照组（P〈0.01）,其中AS2O3高剂量组明显低于低剂量组。双荧光染色结果As2O3高剂量组细胞凋亡百分率明显高于低剂量组和对照组（P〈0.01）。免疫组化结果显示结肠癌细胞HIF-1α和VEGF在对照组的阳性表达率明显高于As2O3治疗组（P〈0.01）,低剂量组高于高剂量组（P〈0.05）。体内实验中,治疗组平均瘤重和瘤体积均较对照组明显减低,（P〈0.01）。HIF-1α及VEGF在裸鼠肿瘤组织中均有阳性表达,其中对照组较AS2O3治疗组高（P〈0.01）。结论：As2O3能够抑制体内外人结肠癌细胞的生长,并能明显抑制HIF-1α和VEGF的表达,从而抑制肿瘤的生长。     

细胞凋亡和代谢基因在转移倾向结肠癌中的研究

目的:应用基因微阵列技术初步筛选与不同转移倾向结肠癌相关的细胞凋亡和代谢相关基因,研究转移相关基因功能.方法:取结肠癌肝转移和无转移结肠癌组织,采用人全基因组表达谱芯片获得两组织的基因表达谱,分析比较两者之间细胞凋亡和代谢基因的差异表达情况;利用基因数据库检索结肠癌相关基因,分析基因功能.结果:应用含有16450个克隆(其中3869个未知)的cDNA微阵列分析发现,细胞凋亡或肿瘤相关基因中,2倍以上(Ratio值小于0.5或大于2.0)差异基因共216个,上调基因85个,下调基因129个.表达差异5倍以上(Ratio值小于0.2或大于5.0)共32个,上调基因10个,下调基因22个.在细胞代谢相关基因中,2倍以上(Ratio值小于0.5或大于2.O)差异基因共205个,上调基因86个,下调基因119个.表达差异5倍以上(Ratio值小于0.2或大于5.0)共15个,上调基因10个,下调基因5个.利用基因数据库检索分析发现5个基因与结肠癌转移关系密切.结论:结肠癌的发生和转移是多基因参与的,本实验应用基因微阵列技术发现细胞凋亡和代谢相关基因中发现5个基因与结肠癌转移关系密切.     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)FGF21基因克隆及其表达分析

采用RT-PCR技术从草鱼肝脏中克隆了成纤维细胞生长21(FGF21)基因序列,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术对该基因在草鱼幼鱼不同组织中表达进行了研究。结果表明,草鱼FGF21基因(Gen Bank登录号为MF_094727)c DNA序列全长615 bp,其中5'端非翻译区51 bp,开放阅读框564 bp,编码187个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,草鱼FGF21基因与斑马鱼同源性最高(78.86%),与犀角金线鲃、鲤、虹鳟、大西洋鲑、罗非鱼和日本青鱂的同源性分别为77.66%、73.94%、53.29%、52.41%、43.71%和35.96%,与人和小鼠同源性较低,分别为31.87%和30.39%。q PCR分析表明:FGF21基因在草鱼幼鱼肝脏、前肠、中肠、后肠、心脏、肌肉、肾脏和全脑中均有表达,在肌肉、前肠和中肠表达量最高,表明该基因可能在草鱼肌肉和肠道等组织发挥重要作用。     

环境及遗传背景对延河流域植物叶片和细根功能性状变异的影响

研究环境筛选作用和植物系统发育背景对植物群落构建产生的影响,有助于理解植物在生长过程中对资源的分配利用和对环境的适应规律。以延河流域3个植被带(森林带、森林草原带及典型草原带)稳定的自然植物群落为研究对象,调查了31个样地107种植物,隶属于35个科78个属,测量了6种叶片和3种细根性状。分别对3个植被带和不同植物科植物的叶片和细根性状做单因素方差分析,结果表明:叶片氮含量和细根氮含量在3个植被带间无显著差异,叶厚度、比叶面积、叶组织密度、叶片磷含量、叶片氮磷比、比根长、根组织密度在3个植被带间差异极显著。由南向北随着气候干旱的加剧,植物通过调节叶片和细根性状,表现出了不同的适应策略:森林带植物叶片相对生长速率高,根系防御力强;森林草原带植物叶片防御力强,根系相对生长速率快。不同科的植物在相同的环境条件下,对于资源的竞争力和胁迫的忍耐力也有所不同,比如豆科植物具有远远高于其他科的叶片和细根氮含量,但是对养分的利用效率并不高。GLM分析结果说明,所涉及的植物功能性状的空间变异主要来自于年均降雨量的变化及植物科的差异,如16.26%的比叶面积的变异可由年均降雨量变化解释,4.02%可由植物科的差异解释。物种水平上,叶厚度、比叶面积、叶组织密度、比根长、根组织密度、叶片磷含量是对气候干燥度变化响应敏感的植物功能性状,其空间变异主要由环境差异所致。延河流域的植物群落在形成过程中,存在明显的环境筛选效应。这表明,环境异质性在植被恢复实践中必须予以考虑。     

CpG 寡核苷酸的安全性实验研究

目的研究CpG 寡核苷酸(CpG ODN)作为免疫佐剂应用可行性.方法按要求配制CpG ODN检测内毒素,采用昆明小鼠和豚鼠进行异常毒性试验和超敏试验;分别以10 μg /只、100 μg /只、300 μg /只3个剂量组CpG ODN进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验;以10 μg /只、30 μg/只、90 μg/只3个剂量组的CpG ODN分别交替于双侧后肢胫前肌肌肉注射Balb/c小鼠,每周2次,连续4周,进行血液学、血生化、病理组织学检查及抗核抗体、抗双链DNA抗体和肿瘤坏死因子检测.结果内毒素检测阴性,实验期内所有动物均未出现异常毒性反应和超敏反应,实验结束后所有动物全部健存且体重增加. CpG ODN小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验为阴性结果;实验期间各组动物未见异常表现,体重增加各组间差异无显著性,血液学、血生化和病理组织学检查未见明显异常.未检测到ANA、ds-DNA.各剂量组肿瘤坏死因子含量在与对照组之间比较差异均有显著性.结论所选用CpG ODN作为生物制品使用是安全的;在受试剂量下微核试验阴性;在小鼠亚急性毒性实验中未引起毒性损害,安全性良好.     

NF-κB在溃疡性结肠炎中的作用

核因子NF-κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）是一种多向性的转录因子,它参与多种炎症和免疫应答相关分子基因的表达,同时也参与调控细胞的增殖和分化。它在动脉粥样硬化、关节炎、哮喘、肿瘤等疾病的发展中都起了重要的作用。炎症是多种细胞及细胞因子参与的机体防御性反应,但严重或长期的炎症则会造成机体损伤。溃疡性结肠炎（UC）是一组以慢性、周期性炎症为特征的肠道疾病,长期、反复的肠道炎症不仅影响患者生活质量,而且增加了肠道纤维化及癌变的风险,而核因子NF-κB与炎症反应关系非常密切。本文就NF-κB的作用与UC的联系作一简要综述。     

急诊内镜下EST并ENBD治疗急性梗阻性化脓性胆管炎

目的:探讨急诊内镜下乳头肌切开(endoscopic sphincterotomy,EST)并鼻胆管引流术(endoscopic nasobiliary draingage,ENBD)治疗急性梗阻性化脓性胆管炎的有效性.方法:对我院132例急性梗阻性化脓性胆管炎患者在急诊内镜下行EST并ENBD,并回顾分析其治疗效果.结果:ENBD全部成功,腹痛发热迅速缓解,无并发症发生.结论:急诊应用EST并ENBD治疗急性梗阻性化脓性胆管炎安全有效,为后续手术治疗创造了有利条件.     

肠镜下置入支架治疗左半结肠癌性梗阻的临床疗效分析

目的:探讨肠镜下置入支架治疗左半结肠癌性梗阻的应用价值。方法:对我院54例左半结肠癌性梗阻的患者行肠镜下支架置入术,恢复肠道通畅性。结果:24例患者永久性植入结肠内支架以姑息的治疗,30例患者暂时植入结肠支架,并行肠道准备,择期外科手术。术后患者无死亡,无相关并发症的发生,均痊愈出院。结论:肠镜下置入支架在治疗左半结肠癌性梗阻中有临床应用价值,既可作为姑息疗法,也可作为术前准备的一部分。     

中华鳖MyoD1基因SNP鉴定及其与生长性状的关联分析

为了研究生肌决定因子1(MyoD1)基因多态性与中华鳖生长性状的相关性,采用直接测序法在MyoD1基因上共检测到6个SNP位点(T-49G、A-38G、C91T、A187T、C880T和T1522A),其中C880T位于外显子上,属于错义突变。对从同批繁殖、同块稻田养殖的2冬龄中华鳖群体中随机选取的178只个体中各位点的基因型进行检测。结果显示,所有位点在中华鳖群体中的平均有效等位基因数、平均观测杂合度和平均期望杂合度分别为1.636 5、0.349 3和0.375 4,除A187T位点外,其余5个位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg定律。采用一般线性模型分析各位点与中华鳖生长性状之间的相关性,研究发现,T-49G位点GG基因型个体的背甲宽显著大于TT基因型,A-38G位点AG基因型个体的背甲宽显著大于AA基因型,A187T位点TT基因型个体的体高显著大于AA基因型,T1522A位点AA基因型个体的体质量显著大于TT、TA基因型,其余位点不同基因型个体间的生长性状均不存在显著差异。T-49G、A-38G、A187T和T1522A位点与生长性状显著相关,可作为中华鳖分子标记辅助育种的候选标记。     

NF-κB在溃疡性结肠炎中的作用

核因子NF-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)是一种多向性的转录因子,它参与多种炎症和免疫应答相关分子基因的表达,同时也参与调控细胞的增殖和分化。它在动脉粥样硬化、关节炎、哮喘、肿瘤等疾病的发展中都起了重要的作用。炎症是多种细胞及细胞因子参与的机体防御性反应,但严重或长期的炎症则会造成机体损伤。溃疡性结肠炎(UC)是一组以慢性、周期性炎症为特征的肠道疾病,长期、反复的肠道炎症不仅影响患者生活质量,而且增加了肠道纤维化及癌变的风险,而核因子NF-κB与炎症反应关系非常密切。本文就NF-κB的作用与UC的联系作一简要综述。