竹荪的菌丝培养及其抗菌性的初步研究

对长裙竹荪（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｉｎｄｕｓｉａｔａ）等３种的菌丝培养进行了研究并初步测定菌丝的抗菌谱。培养液的 ｐＨ和液体培养基粘度是竹荪在液体中生长的关键因素,在 ｐＨ４.７和添加 ０.５％ＣＭＣ－Ｎａ的合适培养条件下竹荪菌丝在液体中能够生长,菌丝得率达到１％。还探讨了其他几种竹荪菌丝的培养方法,为竹荪菌丝的大量生产提供了依据。另外,在竹荪抗菌性实验中发现,竹荪对许多易造成食品腐败的细菌和酵母具有抗性,但没有发现其对霉菌有抗性。     

微生物学教学内容与课程体系改革的初步实践

山东大学微生物学学科是国家重点学科,现设有微生物学本科专业,微生物学硕士点和博士点。山东大学微生物学专业是我国国内成立最早、培养人数最多、开设专业课程最全的理科专业。在１９７７年恢复高考之后,我们逐步把微生物学专业的课程进行补充、扩大,经过二十年的努力,建立起了专业课程齐全的微生物学课程体系。这种课程体系对于学生扎实专业基础知识与能力的培养,起了重要的作用,使毕业生受到使用单位的广泛欢迎。 在新的形势下,面对２１世纪教学内容与课程体系的改革,原有的微生物学课程体系所存在的问题明显暴露出来,一是课…     

金针菇FV088菌株液体培养工艺的研究

通过单因子试验统计分析,优化筛选了适于金针菇（Flammulinavelutipes）FV088的适宜培养基和摇瓶培养条件,结果表明,其适宜的液体培养基组成为：5.0％玉米粉,2．0％鼓皮,0．L％KH₂PO₄,0．05％MgSO₄·7H₂O,10μgVB₁／100ml,50μgVB₂／100ml;适宜的摇瓶培养条件为：培养基的起始pH6．0～7．0,500ml     

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在极端嗜酸性氧化硫硫杆菌中的表达

构建了含大肠杆菌磷酸果糖激酶(EC 2.7.1.11)基因pfkA的重组质粒pSDK1,利用大肠杆菌pfk缺陷株筛选含目的基因的重组质粒,通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌TtZ2中,接合转移频率达2.6×10-6。重组质粒在TtZ2中有较好的稳定性,在无选择压力条件下传代50次基本保持稳定(重组质粒保留68%以上)。酶活性测定、SDSPAGE及RTPCR结果表明,pfkA基因在氧化硫硫杆菌中得到表达,但其表达水平低于大肠杆菌。葡萄糖可促进含pSDK1的氧化硫硫杆菌TtZ2的生长,而对照菌株的生长则未受明显影响,说明重组菌可部分利用葡萄糖作为碳源生长。     

干旱胁迫下棉花幼苗转录因子BES1/BZR1对外源油菜素内酯的响应表达特征

植物激素油菜素内酯(Brassinosteroid,BR)具有提高植物抗旱性的作用,该研究探讨干旱胁迫下外源喷施BR对棉花干旱胁迫响应基因表达的影响。采用PCR方法从棉花‘新陆早17号’幼苗克隆获得1个干旱胁迫响应转录因子基因,命名为GhBES1/BZR1(GenBank登录号KP272000)。序列分析表明GhBES1/BZR1基因开放阅读框为960bp,编码319个氨基酸,理论分子量为34.3kD,理论等电点为8.95。保守结构域分析显示,该基因编码的蛋白具有一个DUF822保守结构域。利用2.5%PEG-6000对棉花‘新陆早17号’幼苗进行干旱胁迫处理24h,再分别喷施水、BR和Z(BR抑制剂),qRT-PCR分析结果表明,PEG-6000干旱胁迫下用BR处理3h后,GhBES1/BZR1基因表达量明显提高,当BR处理6和12h时,GhBES1/BZR1基因的表达量较3h时明显下降。研究认为,在干旱胁迫下对棉花喷洒BR,GhBES1/BZR1基因能够快速表达以响应干旱胁迫,外源喷施BR有助于提高棉花的抗旱能力。     

喷施油菜素内酯对棉花类固醇5α~-还原酶基因(GhDET2)在干旱胁迫下表达影响的分析

为了解植物类固醇5α~-还原酶基因(DET2)作为油菜素内酯(BR)生物合成途径中限速酶的作用。利用RACE技术克隆获得棉花的Gh DET2基因,并进行生物信息学分析,然后对棉花‘新陆早17号’幼苗使用PEG6000模拟干旱胁迫24 h,进行不同浓度油菜素内酯(brassinolide,BR)的喷施处理,分析Gh DET2基因在棉花幼苗根、茎、叶中的表达情况。序列分析表明Gh DET2基因的开放阅读框有774 bp,编码257个氨基酸。荧光定量分析结果显示,用BR处理棉苗3 h和6 h后Gh DET2基因表达量在叶中明显提高,而在根和茎中只略微提高,12 h和24 h时Gh DET2基因表达量较前期还有所降低。喷施BR在短时间内促进Gh DET2基因表达量的升高,推测BR喷施能够短期高效地增强棉花的抗旱能力。     

火菇素的分离纯化及其分子量的测定*

火菇素是一种从金针菇FlammulinaVelutipes中分离纯化出来的具有抗癌活性的简单蛋白。用SDS-PAGE系统,通过与已知分子量的标准参照蛋白比较,确定火菇素的分子量为24kDa,这一结果与其氨基酸组成分析相比偏大,进一步通过电喷雾离子化质谱法(ESIMS)分析,精确测定火菇素的分子量为19891.13Da。推测由于火菇素蛋白与SDS的非正常结合是造成蛋白质在SDS-PAGE中迁移变慢导致偏差的原因。     

火菇素的分离纯化及其分子量的测定

火菇素是一种从金针菇Flammulina Velutipes中分离纯化出来的具有抗癌活性的简单蛋白。用SDS-PAGE系统,通过与已知分子量的标准参照蛋白比较,确定火菇素的分子量为24kDa．这一结果与其氨基酸组成分析相比偏大,进一步通过电喷雾离子化质谱法(ESIMS)分析,精确测定火菇素的分子量为19891．13Da。推测由于火菇素蛋白与SDS的非正常结合是造成蛋白质在SDS-PAGE中迁移变慢导致偏差的原因。     

金龟子绿僵菌原生质体形成和再生的研究

用0.5%纤维素酶和0.5%蜗牛酶的混合酶液,以0.6mol/L KCl为渗透压稳定剂,pH6.5时,30℃处理菌龄为24小时的金龟子绿僵菌3-4小时,可从1克湿菌丝获得5×10⁷个以上的原生质体。原生质体在祭氏培养基上再生率仅为0.1—1.2%。但原生质体先在液体中培养再转移到固体平皿上,再生率可提高到8%。实验还观察和确证了原生质体的形成及其再生。     

火菇素蛋白的免疫印迹检测*

从金针菇子实体浸提液中提取了抗癌活性物质火菇素,将纯化的火菇素用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采血并分离了抗血清,并以抗血清为探针建立了火菇素蛋白的免疫印迹法定性检测方法。应用免疫学方法检测金针菇菌丝体和子实体,结果显示,只在金针菇子实体中发现与火菇素抗体相结合的抗原信号。