肿瘤抑制基因研究新进展：多种瘤抑制基因MTS分子生…

人类第９号染色体短臂不到４０ｋｂ的座位发现了多种瘤抑制基因。它们分别编码两种蛋白：前叫做Ｐ１６蛋白,抑制依赖细胞周期素激酶。后比Ｐ１６小２０多个残基,功能推测与Ｐ１６相近。ＭＴＳ１基因与Ｐ５３相比,它在７５％的各种癌细胞中发生缺失;而Ｐ５３基因的缺失率在各种癌细胞中为５０％。Ｐ１６蛋白是到目前为止发现的第一个直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白,而Ｐ５３控制细胞增殖周期要通过Ｐ２１间接发挥抑制作     

分子生态制剂的发展

生态制剂(ecologizal preporation,ecolagics或Drobihtics)是微生态学的概念,是利用正常微生物群成员或其促进物质,用以维持微生态平衡(microeu-biosis)的生物制品,其作用在于调整微生态失调(microdysbiosis)。我们从微生态     

人巨细胞病毒对单纯疱疹病毒1型抗原表达的影响

我们用免疫胶体金色埋前标记技术和免疫荧光技术研究了人胚肺细胞(HEL)内,人巨细胞病毒(HCMV-AD_(169))对单纯疱疹病毒1型(HSV-ⅠSM_(44))抗原表达的影响,旨在探讨在细胞这一微生境内,一病毒对另一病毒可能发生的影响。电镜下计数HSV-1组和HCMV HSV-1组特异性结合金颗粒数得HSV-1组为657个,HCMV HSV-1组的总数为283个。t检验P<0.01,差别非常显著。并且HSV-1组细胞的胞浆中的病毒颗粒,比HCMV HSV-1组明显多。荧光显微镜下:HSV-1组阳性细胞数为689个HCMV HSV-1组只有484个,经poisson分布u检验,P<0.01,差别非常显著。免疫荧光实验还表明:HSV-1组,抗血清在1:320时仍有荧光清晰的阳性细胞,而HCMV HSV-1组,抗血清在1:160时,却无荧光阳性细胞。细胞病变效应(CPE)动态观察显示:HSV-1组8小时即有细胞病变,24小时蔓延整个单层;而HCMV HSV-1组超感染14小时才有细胞病变。24小时约有75％细胞受累。结果表明HCMV对HSV-1的抗原表达有明显的抑制作用。对抑制作用的可能机理及其在分子生态学中的意义,进行了讨论。     

过表达白鳍鲨硒结合蛋白1对HL-7702细胞镉胁迫的解毒作用

硒结合蛋白1（Selenium—binding protein 1,SBP1）与肿瘤相关,并可以与重金属镉直接结合。该研究构建了白鳍鲨SBP1重组质粒Myc-SBP1并转染人HL-702细胞,利用CCK-8和CFDASE检测Cd胁迫下的细胞增殖情况,利用流式细胞仪检测细胞内ROS的水平。结果显示,过表达白鳍鲨sBP1可拮抗cd对HL-7702细胞的毒害作用。在100μmol／L的CdCl2应激下,表达SBP1组存活率为76．4％。约为对照组存活率的2倍,实验组的细胞增殖指教和分裂能力也略高于对照组。一级结构分析表明,白鳍鲨SBP1具有两个CXXC区域,为抗氧化位点,具有2个HxD和3个HXXH保守区域,它们为推测的Cd结合位点,为在HL-7702细胞中表达白鳍鲨SBP1蛋白能拮抗Cd的结构基础。此外,ROS检测实验表明白鳍鲨SBP1蛋白能显著降低胞内ROS水平,提示硒结合蛋白除通过直接与Cd结合降低毒性外,降低重金属引起的氧化胁迫也可能发挥一定解毒作用。     

汉阳陵陶俑表面微生物群落结构与种群多样性分析

【背景】汉阳陵是我国截至目前发现的规模最大、陪葬级别最高的汉代陶俑群,出土了大量形神毕肖的裸体俑群,考古学家认为这种裸体陶俑原本“着衣、装木臂”,称为“着衣式陶俑”,为皇室独有,异常珍贵。然而这些推测尚无科学依据,而且陶俑表面附着微生物可能会腐蚀俑体。【目的】通过比较研究汉陶俑表面微生物的组成差异,为汉裸体陶俑着有衣物且装有断臂的推测提供一定的科学佐证,同时为汉陶俑微生物腐蚀的防控提供靶标。【方法】应用微生物高通量测序与纯培养相结合的方法,对着衣式陶俑不同部位微生物进行测定。【结果】高通量测序结果显示女俑头部微生物多样性较高;男俑上半身微生物多样性最高,腿部居中,头部较低。汉陶俑表面微生物组成按俑的类别及不同部位聚集在一起,其优势菌为放线菌门的克洛斯氏菌属、糖多孢菌属、假诺卡氏菌属及链霉菌科,其他各部位优势类群相对丰度存在差异,断臂处与碳循环相关功能微生物的相对丰度最高。纯培养结果显示女俑头部的可培养细菌数量高于男俑头部可培养的细菌数量;男俑上身与腿部可培养的微生物数量高于男俑头部,表明上半身与腿部可能有衣物覆盖,导致其营养差异。【结论】汉陶俑头部与身体表面部位微生物多样性与组成存在明...     

穗醛栗叶片中黄酮类物质的研究

本试验以小浆果类果树穗醋栗（黑、红、白）的叶片为试材,利用分光光度法。测定了三种穗醋栗叶（鲜样、干样）中总黄酮的含量及不同提取次数下总黄酮的浸提率,确定了最佳提取次数。结果表明：白穗醋栗叶片中总黄酮含量最高,鲜样785．10mg/100g,干样189.01mg/100g;红穗醋栗叶片次之,鲜样393.22mg／100g,干样1597.73mg／100g;黑穗醋栗叶片中总黄酮含量相对较少,鲜样151.59mg/100g,干样265.03mg/100g。三种穗醋栗叶片浸提三次,总黄酮的浸提率可达到97％以上。此外,利用定性试验（颜色反应）并和标准品芦丁的试验做比较,初步确定三种穗醋栗叶片所含的黄酮类化合物主要是黄酮和黄酮醇两类。     

Nm23-H1/NDPK-A基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增人二磷酸核苷激酶Ａ亚基（ＮＤＰＫ－Ａ）基因,即ｎｍ２３－Ｈ１／ＮＤＰＫ－Ｋ基因的编码序列,经序列分析后,定向克隆于表达质粒载体ｐＢＶ２２０,在大肠杆菌ＤＨ５α中高效表达出重组人ＮＤＰＫ－Ａ．表达产物为可溶性的非融合蛋白,占菌体总蛋白４２％．斑点ＥＬＩＳＡ法鉴定表明表达产物与ＮＤＰＫ－Ａ标准抗血清呈阳性反应．以ＤＥＡＥ纤维素弱阴离子交换层析、ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅ染料亲和层析结合高效液相排阻色谱技术纯化ｒＮＤＰＫ－Ａ,得纯度为９６．７％的目标蛋白．以反相高效液相色谱法进行酶活性分析,表明纯化的ｒＮＤＰＫ－Ａ能催化ＡＴＰ＋ＵＤＰ＝ＡＤＰ＋ＵＴＰ的反应,比活性为８００Ｕ／ｍｇ蛋白．     

p73基因的分子生物学

从分子了生物学水平对新发现的抑癌基因ｐ７３进行综述和报道。ｐ７３和ｐ５３在分子结构,基因功能和生物学活性等方面都具有同源性和相似性。ｐ７３的发现为癌症治疗提供了一条新途径。     

重组人融合基因Nm23-H1/HbFGF的构建及其在大肠杆菌中表达的研究

根据Nm23-H1与HbFGF cDNA序列,人工合成一段中间核酸序列,将它分别与Nm23-H1 cDNA的上游引物及HbFGF cDNA的下游引物组成两对引物,通过PCR(聚合酶链式反应)构建出融合基因Nm23-H1/HbFGF,将其定向克隆于质粒载体pBV220上,经诱导,SDS-PAGE分析,表达产物分子量为34kD,表达量占菌体总蛋白的14%,表达产物以包涵体形式存在,ELISA和Western印迹表明包涵体具有Nm23-H1和HbFGF抗原性,然后对包涵体进行变性、复性及纯化处理,取纯化产物进行定性和生物活性分析,结果证明纯化产物具有Nm23-H1和HbFGF的抗原性及生物活性。以上实验为今后进一步研究融合基因Nm23-H1/HbFGF在真核细胞中的抑癌、致癌性质打下了基础。