人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外配体结合域的筛选及其结构分析

 血管内皮生长因子受体 Flt- 1胞外区具有 7个免疫球蛋白样的袢 (Ig- like loop) ,氨基端 3个loop负责与其配体 VEGF的结合 .为了寻求能与配体结合的更小的 Flt- 1片段 ,在对 Flt- 1胞外前3个 loop氨基酸组成和晶体结构分析的基础上 ,应用酵母双杂交系统对 Flt- 1的配体结合域进行筛选 .利用 PCR技术 ,从人胎盘 c DNA文库扩增出 4个截短的 Flt- 1 c DNA,分别含胞外第 2 ,1 - 2 ,2 - 3和 1 - 3个 loop,构建酵母双杂交系统融合表达质粒 ,并将 p GBT9/h VEGF165与 p GAD42 4 /Flt- 1 s两两配对转化酵母菌 SFY52 6,采用滤纸法和液体培养定量检测法对阳性克隆进行β-半乳糖苷酶活性分析 .结果显示 ,Flt- 1胞外 loop 2 - 3与 loop 1 - 3的配体结合能力相差不大 ,loop 1 - 2的结合力较弱 ,单独第 2个 loop无配体结合能力 .     

养殖牙鲆淋巴囊肿病病原的研究

近几年我国海水养殖鱼发生病毒性传染病,病鱼鳍、鳃及体表皮肤出现乳头瘤样赘生物。将发病牙鲆（Ｐａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓ ｏｌｉｖａｃｅｕｓ）表皮瘤组织进行超薄切片,电镜下在病变组织明显肥大的细胞胞浆内一球状病毒,呈二十面体对称,具包膜,直径约２１０ｎｍ。根据虹彩病毒主要衣壳蛋白（ｍａｊｏｒ ｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｓｅｉｎ,ＭＣＰ）基因中间保守区序列设计简并引物,应用ＰＣＲ方法从病变组织中扩增出长６３６ｂ