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目的:对分化抑制蛋白(Id)家族的N端序列进行保守性结构分析,并构建其基因突变体。方法:用ClustalX(1.81)软件对Id蛋白家族中的3个成员(Id1~Id3)的N端序列进行同源性分析,用Swiss-PdbViewer3.7(SP5)软件模拟高同源区域中关键性氨基酸突变前后的三维结构模型;用PCR方法将突变点引入Id序列,再通过重叠PCR方法扩增出全长编码序列,酶切与测序确证突变序列的准确性。结果:Id1~Id3蛋白的N端存在一个由11个氨基酸残基形成的高度保守的环-螺旋(Loop-Helix)结构,将其中最保守的丝氨酸与亮氨酸分别突变为甘氨酸与缬氨酸,将突变后的Id基因序列重组到pGEX原核表达载体中。结论:在Id1~Id3蛋白N端识别了一个保守的Loop-Helix结构,为深入研究其协同的功能特征提供了结构依据;突变其中的丝氨酸为研究Id蛋白潜在的磷酸化修饰及相应功能特征的改变奠定了基础。 相似文献
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儿童哮喘是一种肺部疾病,肠道菌群在其免疫和代谢等诸多方面扮演着重要角色,肺肠之间微妙的关系可能是影响疾病发生、发展及预后的潜在机制。通过分析肺与肠的结构和功能,发现从中医学和现代医学角度均可证实肺肠具有表里同源关系。津液/黏液是肺肠之间的重要物质,影响哮喘儿童痰的生成及变化。肺肠之间的微生物可随津液/黏液定植,且菌群结构的变化又与儿童哮喘密切相关。基于肺肠结构关系及二者间物质的沟通作用,发现哮喘患儿不仅存在肠道菌群失衡,且肠道菌群与免疫应答和肠道代谢之间的关系,可能是防治儿童哮喘的新途径,值得进一步探索。
相似文献3.
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人生长激素基因在哺乳动物培养细胞中的导入与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
将小鼠金属硫蛋白I(MT—I)启动子置换人生长激素(hGH)基因的启动子,构建成MT—hGH嵌合基因。当与疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因(tk)的质粒共转染小鼠L—tk-细胞,在tk+转化细胞中所整合的MT-hGH基因可被重金属镉诱导。获得可表达和分泌hGH的细胞株,其中一株hGH的产率为2.5μg/106细胞/24h.所产生的hGH分子量为22000道尔顿,表明小鼠L一tk+细胞株能对外源hGH基因所产生的mRNA进行正确的加工并能删除激素原的信号肽。 相似文献
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