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PCR,技术的应用，极大方便了对已知序列基因某一片段的克隆，但在实际操作中某些容易忽视的因素有可能导致实验失败，以下将我们在这方面工作中的几点体会总结如下以供借鉴。1．引物设计。在引物5＇端设计酶切位点序列时一般要加保护碱基，如BamHI识别序列为5＇-GGATCC，应设计成5＇－CGGGATCC，这样才能保证下一步酶切反应的正常进行，因为5＇端裸露的位点往往不能为限制酶识别，具体何种位点加什么保护碱基可参阅NewEnglandBiolabs96／97Catalog或其它有关材料。2．片段处理。PCR扩增片段最好用酚：氯仿抽提以除尽Taq酶，单纯… 相似文献
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本文介绍以手术摘除的人脑胶质瘤为标本,应用蔗糖梯度离心建立的一种较为简便的人脑胶质瘤细胞质膜制备法。经标记酶测定,化学组成分析及电镜检查,证实质膜具有一定的纯度。质膜中5’-核苷酸酶(质膜标记酶)活性为全匀浆的8.2倍,其它亚细胞组份污染较小。质膜收量为24.6％。生化测定还显示质膜5’-核苷酸酶活性随着胶质瘤恶性程度升高而下降。 相似文献
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血清蛋白中一些蛋白质的特性,往往因人
而异,即其遗传表型不同。如结合珠蛋白（Haptoglobin,
Hp）可分为Hpl一1型、Hp2一1型、
Hp2-2型及一些稀有类型;Gc球蛋白有Gcl-
1型、Gc2-1型及Gc2-2型等;转铁蛋白（Transferrin,
Tf)中C型以压倒多数的频率出现,
但亦有少见的10种B型变种和11种D 型变
种‘,,;极少数人的白蛋白（Albumin, Alb）表现
为双白蛋白（有快型与慢型之别）[27。这些遗传
变异与种族及地区等因素密切相关。不同遗传
表型蛋白质的生理功能差异及其与疾病的关系
也引起人们的注意和兴趣。以往对血清蛋白遗
传表型的研究,一般采用单向电泳（淀粉胶电
泳、圆盘电泳等）结合特殊染色或免疫化学方法
逐一分别鉴定;本文报告了用分辨率更f的微
型双向电泳,同时对多种血清蛋白遗传表型进
行鉴定的研究结果。 相似文献
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