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为了探明Ayu17-449基因在小鼠生长发育过程中的功能, 用特殊的诱捕载体(Gene trapping vector)导入小鼠ES细胞中,5′RACE、Southern blot方法鉴定成功地单一捕获Ayu17-449基因后,由这种ES制作了Ayu17-449 敲除小鼠并用Northern blot方法该基因在突变小鼠体内的表达。结果在Ayu17-449 敲除小鼠体内,诱捕载体位于Ayu17-449基因的翻译起始密码上游,Ayu17-449基因的转录被抑制。表明Ayu17-449敲除小鼠为分析Ayu17-449基因的功能提供了可靠的实验材料。
相似文献
2.
利用捕获载体解析小鼠基因在生物发育过程中的功能 总被引:9,自引:0,他引:9
利用特殊构建的捕获载体(trapping vector)随机插入胚胎干细胞(ES细胞)的基因组,被插入基因的转录过程被迫中止,用这样的ES细胞制作出小鼠,可以得到被插入基因的小鼠变异系,通过对变异小鼠的表现型分析。阐明该基因在生长发育过程中的功能和作用。 相似文献
3.
目的 确立基因捕获细胞中被捕获的基因名称. 方法 Southern印迹确定合适的限制性内切酶,用质粒拯救(plasmid rescue)获得含有细胞染色体DNA的质粒,测序.结果 本次实验中,被捕获载体整合的基因是AZI基因. 结论质粒拯救方法能确立质粒整合细胞染色体上准确的位置. 相似文献
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