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碱性蛋白酶基因在Bacillus licheniformis 2709中的整合和扩增 总被引:2,自引:0,他引:2
将含有去掉启动子的枯草杆菌碱性蛋白酶基因和Cm抗性基因的整合质粒pMP以原生质体PEG法转化B.licheniformis2709在10u/mlCm平板上筛选整合子,并通过不断提高整合子的抗氯霉素能力来扩增染色体碱性蛋白酶基因,最终选到一株产酶比生产菌2709提高60%的高表达整合菌BL-203,该菌在无选择压力下遗传性状相当稳定。 相似文献
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嗜碱性芽孢杆菌N—227环状糊精葡基转移酶基因在枯草杆菌中的整合表达 总被引:2,自引:0,他引:2
大多数枯草杆菌载体在表达外源基因时会出现分离或结构不稳定,而将目的基因整合至染色体上的基因整合方法,近年来得到人们的普遍关注。通过构建一套整合载体,将β-环状糊精葡基转移酶基因随机整合至枯草杆菌1A289的染色体上,从表达氯霉素抗性及β-CGTase阳性株中选得菌株Bs2,其氯霉素抗性为5γ/ml,β-CGTase酶活为266μ/ml。后又经多次整合及更高浓度氯霉素抗性的选择,获得一株Bs16-7 相似文献
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耐高温α—淀粉酶基因在枯草杆菌染色体上的整合,扩增及表达的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过构建一套整合载体,将来自嗜热脂肪芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因以及质粒pC194上的一段Cm抗性基因随机整合至枯草杆菌1A289染色体上,通过提高整合菌的抗氯霉素能力和反复进行整合,可提高耐高温α-淀粉酶基因在染色体上的拷贝数,最终耐高温α-淀粉酶基因在染色体上的拷贝数由整合初的一个增至七个以上。同时,在无选择压力的情况下,可产酶220u/ml以上。 相似文献
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