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周轶平 ROCHAT Anne HATZFELD Antoinette PEIFFER Isabelle BARBET Romain HATZFELD Jacques 李玛琳 《分子细胞生物学报》2009,42(3):193-199
为了探讨低浓度bFGF诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)生成的条件培养基对人胚胎干细胞(hESC)生长分化的影响,以系列浓度的bFGF作用于MEF上,收集条件培养基(bFGF—MCM),用于hES2细胞的无滋养层培养。以不添加bFGF而收集的MEF条件培养基(MCM)为阴性对照.同样浓度的bFGF添加于SR培养基(bFGF—SR)为空白对照。通过形态学特征和碱性磷酸酶染色法对hES2的生长分化状态进行评估。结果发现.培养一周内,未分化hES2克隆的比率,阴性对照为23%:空白对照组为13%-31%。当bFGF浓度为0.1,0.3,1,4ng/ml时,bFGF—MCM组未分化克隆的比率分别为44%,74%,77%和78%,与阴性和空白对照组相比,未分化克隆的比率均有不同程度提高.差异有统计学意义(P〈0.01)。该结果揭示了经bFGF诱导的MEF细胞所产生的条件培养基具备了维持hES细胞正常生长而不分化的能力。对bFGF—MCM的深入分析.有望更好地了解hESC的生长与分化机制。 相似文献
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目的探讨TGF-β/Activin/Nodal信号通路的相关因子Activin A和Lefty A在一定浓度范围内,对人胚胎干细胞(hESC)自我更新的影响。方法在hES3细胞株的无滋养层无血清培养体系中加入1-100ng/ml的Activin A和Lefty A。7天后,通过碱性磷酸酶染色法对hES3细胞的自我更新状态进行评估。结果 Activin A在浓度为1,3,10,30和100ng/ml时,与阴性对照(SR培养基)组相比,未分化克隆的比率从7.7%分别提高到了18.5%,46.8%,61.4%,64.4%和79.1%,差异有统计学意义(P<0.01)。Lefty A组在浓度为1,3,10,30和100ng/ml时,与阴性对照(MCM培养基)组相比,未分化克隆的比率从80.5%分别降低到了72.4%,74.6%,72.2%,69.5%和65.3%,在浓度为100ng/ml时,差异有统计学意义(P<0.05)。结论较低浓度的Activin A即能有效维持hESC的自我更新,而较高浓度的Lefty A能诱导hESC分化。该结果进一步揭示了TGF-β/Activin/Nodal信号通路及其相关因子对hESC自我更新和分化的作用特点,有待对其机制进行深入研究。 相似文献
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