微囊藻毒素降解方法的研究进展

当前,由于水体富营养化情况的不断加重,导致蓝藻等一些淡水藻类的过度生长,给生态环境及人类健康带来了一系列严重的问题.藻类水华对环境及对人类的危害已经越来越受到人们重视,其中微囊藻毒素会引发各种致命的疾病,包括肝癌、肠癌等,对人类的健康已经构成较大的威胁.如何对微囊藻毒素进行有效地降解,已经成为了国内外相关科研人员的研究重点.本文就当前对于微囊藻毒素的传统处理方法包括混凝法、活性炭吸附法、反渗透及膜滤处理法、氯化法、臭氧氧化法、光催化氧化、高锰酸盐降解以及较新的生物处理方法包括纯种菌的降解和混合菌的降解进行一个全面的综述,对各种方法的特点、适用范围以及应用前景做一个归纳和展望.     

利用CRISPR/Cas9技术构建稳定表达人白蛋白基因的中国仓鼠卵巢细胞系

通过目的基因的随机整合方式,构建得到的CHO表达细胞系,常会因为目的基因插入到染色体内不稳定区域,而在长期传代过程中出现表达不稳定的现象,这主要是由于位点效应所导致的。为了解决这个问题,现利用CRISPR/Cas9技术介导的同源重组,将目的基因直接整合于CHO细胞染色体上的稳定表达区域,以克服位点效应带来的CHO表达细胞系的长期表达不稳定。利用该技术总共获得了2株外源基因(人白蛋白基因)定点整合细胞系; Western blot结果显示,细胞上清液的产物具有人白蛋白抗原性;细胞在贴壁状态下,两株细胞系在第3、12、23、35、50代,细胞每日表达的HSA质量接近,且均维持在0. 5pg cell/d;选取一株表达细胞系,经悬浮驯化后,在批次条件培养下,第1、25、50代的悬浮细胞,在摇瓶内的表达浓度均稳定在13～14mg/L。显示了将外源基因定点整合于CHO细胞基因组内的可行性;且外源基因整合在稳定表达区域后,重组细胞系具有对外源基因长期表达的稳定性。