检测心肌细胞钾离子通道蛋白活化水平方法的优化

介绍了一种如何合理的利用蛋白质免疫沉淀和蛋白质免疫印迹相结合的方法检测大鼠心肌细胞钾离子通道蛋白Kv1.2和Kv1.5的表达与活化水平。实验结果表明, 与单独利用免疫印迹的方法相比较, 本实验是对钾离子通道蛋白及其它亚家族的钾通道蛋白磷酸化表达水平检测方法的一种优化, 从而获得一套可行、简单、合理的实验方案, 同时也提高了检测的准确性, 敏感性及特异性。     

检测心肌细胞钾离子通道蛋白活化水平方法的优化

介绍了一种如何合理的利用蛋白质免疫沉淀和蛋白质免疫印迹相结合的方法检测大鼠心肌细胞钾离子通道蛋白Kv1.2和Kv1.5的表达与活化水平.实验结果表明,与单独利用免疫印迹的方法相比较,本实验是对钾离子通道蛋白及其它亚家族的钾通道蛋白磷酸化表达水平检测方法的一种优化,从而获得一套可行、简单、合理的实验方案,同时也提高了检测的准确性,敏感性及特异性.     

9—蒽羧酸对豚鼠心室动作电位和L型Ca电流的影响

目的：研究９－蒽羧酶（９－ＡＣ）对豚鼠以肌动作电位（ＡＰ）和Ｌ型Ｃａ电流（Ｌｃａ）的影响。方法：电流钳配合制霉菌素膜等孔方法记录心室肌动作电位,用全细胞式膜片钳（Ｗｈｏｌｅ ｃｅｌｌ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ）技术记录Ｌｃａ。结果：在低ＣＩ＾－状态下,β肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素（ＩＳＯ）可使动作电位时程（ＡＰＤ）明显延长。９－ＡＣ单独使用时对ＡＰ无作用,但在ＩＳＯ的作用下,蛋白磷酸酶抑制剂９－Ａ     

介绍一种方便的细胞内灌流装置

本文研制了一种一体化的细胞内灌流换液装置,能使电极内液在４ｓ内全部被更换,同时又有效地避免了噪音干扰。我们用该装置观察了豚鼠心室肌ｃＡＭＰ－依赖性氯离子通道的调控,表明该装置操作简便、用液节省、适用有效。     

心室肌Cl~－通道电流的性质及其意义

近年来,在豚鼠、兔心室肌上发现了一种由β－肾上腺素能激活的Ｃｌ~－电流（Ｉ＿Ｃｌ）。此种Ｉ＿Ｃｌ的主要特点为：外向整流性质,时间不依赖性,对细胞外Ｎａ~＋变化敏感,Ｃｌ~－通道的活动受细胞内ｃＡＭＰ依赖性蛋白激酶Ａ的调节。Ｉ＿（Ｃｌ）的发现不仅证明心肌上有Ｃｌ~－通道,而且近来研究表明,Ｉ＿（Ｃｌ）在调节心肌动作电位时程和静息电位方面起主要作用。研究结果还提示Ｉ＿（Ｃｌ）可能与病理状态下某些心律失常的发生有关。     

2007离子通道和药物研发国际研讨会召开

由中国神经科学学会、中国生物物理学会和中国生理学会联合主办，大连大学承办的“2007离子通道和药物研发国际研讨会”于2007年7月20—23日在环境美丽优雅的大连大学胜利召开。[第一段]     

9-羧酸蒽诱导心肌细胞表达c-fos及其胞内影响因素的研究

近来发现Cl^-通道抑制剂9－羧酸蒽（9－AC）有是一种新型的磷酸酶抑制剂。本研究观察了蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）及非特异性磷酸酶抑制剂对9－AC诱导的新生大鼠培养心肌细胞c-fos表达的影响。同时利用放免法测定了细胞内cAMP和cGMP的变化,旨在探讨影响9－AC诱导c-fos的胞内因素。结果显示,9－AC（0.5mmol/L）可显提高心肌细胞FOS样免疫阳性细胞数及染色强度。该作用不PCK抑制剂Chelerythine(1μmol/L）预处理的影响,而用PKA抑制剂H－89（10μmol/L）预处理心肌细胞,可减弱9－AC的作用,但FOS蛋白的表达量仍显高于基础水平。与之相比,相同条件下异丙肾上腺素（Iso）对FOS蛋白表达的诱导作用不受PKC抑制剂影响,但PKA抑制剂可使之完全抑制。非特异性磷酸酶抑制剂钒酸盐（VO4,1.5mmol/L）亦可显增强FOS的表达,9－AC不能使该作用进一步增强。放免测定显示9－AC（0.5mmol/L）对胞内cAMP和cGMP无显性影响。而Iso（10μmol/L）可明显升高cAMP的浓度。结果表明,9－AC可诱导培养的新生大鼠心肌细胞表达c-fos,其胞内作用途径与PKA的活性部分相关,而与cAMP、cGMP水平及PKC无关,上述作用特点及其与非特异性磷酸酶抑制剂相似的作用提示9－AC诱导c-fos表达可能是它影响了参与核内基因表达的蛋白转录因子的脱磷酸化过程。     

NAD~+/NADH代谢机制研究进展

NAD+/NADH是细胞能量代谢所必需的辅酶,小到细胞的各种生命活动,大到整个生命结构的平衡,都需要能量来维持。同时,细胞的氧化还原状态,特别是NAD+/NADH的水平直接影响着细胞的节律、衰老、癌变和死亡等重大生命过程。故而有关细胞内NAD+或NADH代谢的研究近年在国际上形成了一个新的热点。我们以NAD+/NADH代谢为重点,综述国内外关于该机制的研究现状。     

心室肌Cl—通道电流的性质及其意义

近年来,在豚鼠,兔心室肌上发现了一种由β－肾上腺素能激活的Ｃｌ＾－电流。此种ＩＣｌ的主要特点为：外向整流性质,时间不依赖性,对细胞外Ｎａ＾＋变化敏感,Ｃｌ＾－通道的活动受细胞内ｃＡＭＰ依赖性蛋白激酶Ａ的调节。     

慢性烟酰胺超载与2型糖尿病流行的关系

2型糖尿病是全球性日益严重的公共卫生问题。目前人们普遍接受的观点是2型糖尿病是基因与环境相互作用的结果,但二者如何作用尚不清楚。众所周知,饮食因素在糖尿病发病中起关键作用,而全球性糖尿病快速流行发生于尼亚新(烟酸或烟酰胺)强化食物之后,因此不能排除长期尼亚新摄入过量与糖尿病流行有关。我们最近的研究显示烟酰胺超载及解毒减慢均可引起氧化应激和胰岛素抵抗。本文结合相关文献资料,就尼亚新代谢、糖尿病人烟酰胺代谢特点、皮肤在烟酰胺代谢中的作用、药物对烟酰胺代谢的影响、以及饮食习惯和食品强化等因素与糖尿病流行的可能关系做一概述。我们认为,糖尿病时基因与环境相互作用的本质可能是长期烟酰胺超载所致的慢性中毒与机体相对较低的解毒/排泄能力的综合反映,因此,减少尼亚新摄入可能是遏制糖尿病流行的关键措施。