一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序

介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段,两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后,在Mg²⁺存在的条件下,用DNaseⅠ切割成10～50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增,获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因.     

环氧水解酶的结构基础及新酶开发

环氧水解酶能应用于外消旋环氧化物的动力学拆分或对映归一性水解制备光学纯的环氧或邻位二醇,具有广阔的应用前景。近年来,多个环氧水解酶晶体结构的报道使人们对它的结构基础有了更深入的理解。随着基因信息的增长,分子生物学和蛋白质工程技术的发展大大简化了大量克隆表达多样性环氧水解酶的过程,降低了环氧水解酶分子改造的难度,为新型具有工业应用潜力的环氧水解酶的开发提供了技术支持。本文综述了环氧水解酶的结构与机制以及近年来环氧水解酶重组表达及分子改造的研究进展。