多种被子植物花粉生殖细胞大量分离技术的比较研究

从11种植物的成熟花粉粒中分离出大量生活的生殖细胞。比较了四种分离方法(一步渗透压冲击法、二步渗透压冲击法、低酶法和花粉原生质体释放法)在不同植物中的效果。归纳出三类植物适于采用三种分离方法。研究了影响分离效果的若干重要因素。对5种植物的分离生殖细胞进行了纯化。经鉴定,纯化的细胞群体中80%以上的细胞是生活的。     

花粉生殖细胞的大量分离与纯化

被子植物的花粉生殖细胞是精子的前体,在生殖过程中占有重要地位。由于它被营养细胞与花粉壁包围,一般只能以花粉粒为单位进行研究。1986年以来,我们用压片法分离出花粉生殖细胞,作了有关细胞生物学研究,同时指出分离的生殖细胞用于离体培养与遗传操作的意义。作者参考了 Russell 分离精子的一步“渗透压冲击法”,建立了适于大量分离与纯化生殖细胞的“二步渗透压冲击法”(以下简称“二步法”)。此外,还作     

花粉生殖细胞的融合试验

花粉生殖细胞(以下简称生殖细胞)是精子的前身,具有单倍体遗传组成。核大质小,缺乏典型细胞壁等特点是生殖系统中天然的单倍体核质体类型。值得在植物细胞工程中加以开发利用。为此,我们曾开展了生殖细胞的大量分离与离体培养研究。在此基础上进一步进行了生殖细胞的融合试验,结果表明,用 PEG 法可以诱导同种或异种生殖细胞之间以及生殖细胞与体细胞愿生质体之间的融合。