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白地霉Cryytococcus neoformans脂肪酶的双水相萃取 总被引:2,自引:0,他引:2
本文研究了不同无机盐的双水相体系对白地霉脂肪酶的萃取分离效果,对PEG/(NH4)2SO4成相系统进行了系统的研究,通过考察体系PEG分子量、不同的无机盐、PEG浓度、(NH4)2SO4浓度、离子强度、pH值及(NH4)2SO4浓度对反萃取的影响,并通过正交实验进一步优化了实验条件,初步确定在PEG浓度15%,(NH4)2SO4浓度22.5%,pH8.0,不加NaCl的条件下进行双水相萃取,脂肪酶分离系数和纯化倍数分别为6.8和7.5,比活力达到40.3 U/mg蛋白。 相似文献
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蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10, AmPR-10)具有核酸酶活性,对黄芪生长发育及抗病机制具有重要意义。但从天然黄芪中提取蛋白质的传统方法成本较高,蛋白得率较少。研究首次利用大肠杆菌表达体系对AmPR-10进行可溶性外源表达,构建了3种重组子:①以pET28a为载体构建pET28a-AmPR-10;②以pET30a为载体构建pET30a-AmPR-10;③以pET30a为载体、大肠杆菌分子伴侣skp修饰构建pET30a-skp-AmPR-10。通过SDS-PAGE分析,目的蛋白可溶性表达量比较结果是:pET30a-skp-AmPR-10 > pET30a-AmPR-10 > pET28a-AmPR-10。由蛋白质三级结构模拟分析发现,载体pET-30a上的标签S-tag通过影响AmPR-10局部α螺旋构象而提高目标蛋白的可溶性表达,分子伴侣skp通过提高融合蛋白整体α螺旋比例进一步提升目标蛋白可溶性表达量。研究解决了目前从天然黄芪中提取蛋白操作复杂、提取量小的问题。同时,经测定,目的蛋白具有核酸酶活性,为外源AmPR-10相关活性研究提供了依据。 相似文献
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鲍姆木层孔菌(Phellinus baumii)俗称桑黄菇,桑耳,是近年来开发的一种多年生药用真菌。已经有研究证实,桑黄具有降血糖,抗氧化,抗肿瘤等生物活性。该研究从化学成分的分离纯化和结构鉴定入手,寻找鲍姆木层孔菌子实体中具有抗肿瘤活性的化合物,为桑黄保健品的开发提供研究基础。采用色谱柱层析法,从鲍姆木层孔菌子实体中分离得到6个化合物,通过波谱分析,分别鉴定为Ergosta-7,22-diene-3β-ylpentadecanoate,Stellasterol,Ganoderol B,Ergos-t6,22-diene-3β,5α,8α-triol,Ganoderic acid DM,Inoscavin A。体外试验结果表明:化合物GanoderolB和Inoscavin A对肿瘤细胞HepG2的增殖均有抑制作用。其中,化合物Inoscavin A的抑制作用较强,其抑制肿瘤细胞增殖的IC50值为72.3μg/mL(156.4μmol/L)。 相似文献
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目的:研究异丙肾上腺素诱导的病理性心肌肥厚大鼠心肌组织及血浆中钠氢交换体1(sodium—hydrogen exchanger1,NHE—1)的表达,探讨NHE1在心肌肥厚发生和发展中的作用。方法:30只雄性SD大鼠随机并平均分为2组:病理性心肌肥厚组和对照组,每组15只,病理性心肌肥厚组(以下简称ISO组)予以ISO(异丙肾上腺素)连续每日以20、10和5mg/kg的剂量递减皮下注射,再以3mg/kg的剂量维持皮下注射7d,对照组予相同剂量生理盐水皮下注射。给药结束后进行心脏超声检测左室舒张末径(LVEDD)、左室收缩末径(LVESD)、室间隔厚度(IVST)、短轴缩短率(FS)、左室射血分数(LVEF)。分别测定各组大鼠体重(Bw)、心室重量(VW)、左心室重量(LVW),计算心室重量指数VWI(VW/BW)、左心室重量指数LVWI(LVW/BW)。取血检测血浆中NHE.1的浓度,并取心肌组织观察病理形态学特征,用免疫组化法检测心肌组织中NHE—1的表达量。结果:与对照组相比,ISO组大鼠LVEF、IVST显著增加(P〈0.05),LVESD明显降低(P〈0.05),VWI、LVWI明显增加(P〈0.01),血浆NHE—1浓度明显升高(P〈0.01),心肌组织NHE-1表达增多(P〈0.01)。结论:NHE-1可能在病理性心肌肥厚的发生和发展过程中起着重要作用。 相似文献
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p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的观察p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学改变.方法分别选取2、6、12、18、24月龄的SPF级p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠和p21+/+野生型小鼠,剖检进行大体观察,取肝脏及肝脏肿瘤组织,进行组织学HE染色及电镜超微结构观察.结果 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏大体、光镜和电镜下均有明显病理改变.随着月龄的增加,肝脏色暗质硬,表面有结节和肿瘤形成;光镜下,肝细胞浊肿,炎症细胞浸润,脂肪变性,点状、灶状和碎屑状坏死,非典型增生,肝细胞癌.癌细胞分化良好,类似肝细胞,形成索状和腺泡状结构.癌细胞核深染,具核分裂像.电镜下,癌细胞核变形,核膜曲折凹陷,线粒体肿胀,数目增多,嵴减少.4例18月龄转基因小鼠发生肝细胞癌(4/10),6例24月龄的转基因小鼠发生肝细胞癌(6/10),其中2例发现远处转移.结论 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏出现明显病理损害,18月龄小鼠开始发展成高分化的肝细胞癌,高龄小鼠形成的肝细胞癌能够转移. 相似文献
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[目的]探讨乙型肝炎病毒表面抗原定位整合(p21HBsAg/HbsAg)转基因小鼠肝癌发生过程中PCNA的表达及意义。[方法]分别选取2,6,12,18,24月龄的SPF级转基因小鼠,取肝脏及肝脏肿瘤组织,进行免疫组织化学S-P法染色。[结果]①阳性肝细胞核内可见棕黄色反应颗粒;②2,6月龄转基因小鼠肝脏有少量散在分布的肝细胞呈PCNA阳性表达,阳性率分别为2.5%,3%;12月龄转基因小鼠肝脏PCNA阳性表达主要出现在非典型增生的肝细胞,阳性率23.65%;18月龄转基因小鼠发生的肝细胞癌PCNA阳性率61.68%;24月龄的转基因小鼠发生的肝细胞癌PCNA阳性率63.56%。12月龄转基因小鼠PCNA阳性率高于2,6月龄转基因小鼠(p<0.01),18月龄和24月龄的转基因小鼠PCNA阳性率高于12月龄转基因小鼠(p<0.05)。[结论]①PCNA能准确反映乙型肝炎病毒表面抗原定位整合转基因小鼠肝细胞的增殖能力,PCNA与肝细胞癌的发生、发展密切相关;②非典型增生的肝细胞有较高的PCNA阳性表达,是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群。 相似文献
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目的:飞行人员中睡眠问题发生率高,影响白天工作效能,危及飞行安全,寻找安全有效治疗方法为保证飞行十分必要,本实验观察不同治疗方法在治疗飞行人员慢性失眠的临床疗效,为飞行人员慢性失眠的临床治疗提供一种安全有效的措施。方法:将我院自2007年至2013年收治的52例飞行人员中的慢性失眠患者,排除严重影响睡眠的器质性疾病,随机分为舒乐安定组、中药治疗组和耳针及生物反馈联合治疗组。分别在治疗前、治疗结束后第2天采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)对患者的睡眠质量进行评价。结果:治疗结束后3组PSQI均较治疗前均有所改善,其中舒乐安定治疗组优于中成药及耳针及生物反馈联合治疗组,差别有统计学意义(P0.05),中成药物治疗组与耳针及生物反馈联合治疗组无明显统计学差异(P0.05)。但对于重度的睡眠障碍,单独采用舒眠胶囊或生物反馈治疗,治疗效果欠佳。结论:舒乐安定治疗失眠疗效确切,但由于其影响工作效能,危及飞行安全较少使用,中成药物、耳针及生物反馈治疗安全有效,病人易于接受,是较好的治疗飞行人员慢性失眠的方法。 相似文献
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为了解“玉露香梨”采前落果特点及成因,本研究分别对迷向区、生草区、清耕区3个区的落果特点进行了分析.结果表明,“玉露香梨”采前落果主要由梨小食心虫(Grapholitha molesta)、黄粉蚜(Aphanostigma jakusuiense)、自然落果、鸟啄4种情况造成;3个区域中以梨小食心虫造成落果占比最高,为63.31%,其次为自然落果,占比34.43%,两者均显著高于黄粉蚜和鸟啄造成的落果;梨小食心虫是造成落果的主要原因并且边缘位置发生程度高于中心位置.本研究最后提出防止香梨落果的具体防治措施,可为“玉露香梨”虫害防治提供理论支撑. 相似文献
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以桑黄、桦褐孔菌、灵芝、蛹虫草、姬松茸、鸡腿菇、猴头、灰树花、香菇和杏鲍菇等十种食药用菌作为研究对象,利用超氧阴离子和过氧化氢自由基清除模型、H2O2和NaN3分别诱导的PC12细胞氧化损伤和细胞衰老模型,比较了10种食药用菌醇提物抗氧化和抗衰老功效。研究结果表明,200 mg/mL桑黄、桦褐孔菌和灵芝子实体醇提物对超氧阴离子和过氧化氢的清除率分别为96.11%±0.30%、75.92%±0.77%、65.60%±6.66%和99.31%±0.03%、97.51%±0.05%、71.01%±0.79%;对PC12细胞氧化损伤和细胞衰老的修复作用分别达到0.868%±0.078%、0.270%±0.004%、0.261%±0.013%和1.419%±0.070%、0.693%±0.036%、0.701%±0.031%,均明显好于其它食药用菌。 相似文献