脂肪细胞空泡的制备

本文报道使用高渗氯化钠溶液制备脂肪细胞空泡。得到的空泡用Harris 苏木素染色不着色,说明空泡中基本上不含细胞核。用苏丹Ⅲ染色呈极浅的橙红色,表明空泡中含少量脂质。细胞标志酶活力测定表明:空泡的碱性磷酸酯酶活力比完整细胞的高3.5倍,琥珀酸脱氢酶活力和还原辅酶Ⅱ-细胞色素c 还原酶活力均极低。空泡中DNA 含量几乎测不出。以上结果均表明这样得到的空泡,细胞器的含量很低。经测定,空泡对半夏蛋白及胰岛素的结合能力与完整细胞相同。根据组织化学鉴定、细胞器标志酶及细胞膜受体测定说明,用高渗法制备的脂肪细胞空泡主要成分是细胞膜,且保持了膜上受体的活力,适用于膜受体的结构和功能的研究。     

脂肪细胞空泡的制备

本文报道使用高渗氯化钠溶液制备脂肪细胞空泡。得到的空泡用Harris苏木素染色不着色,说明空泡中基本上不含细胞核。用苏丹Ⅲ染色呈极浅的橙红色,表明空泡中含少量脂质。细胞标志酶活力测定表明:空泡的碱性磷酸酯酶活力比完整细胞的高3.5倍,琥珀酸脱氢酶活力和还原辅酶Ⅱ-细胞色素c还原酶活力均极低。空泡中DNA含量几乎测不出。以上结果均表明这样得到的空泡,细胞器的含量很低。经测定,空泡对半夏蛋白及胰岛素的结合能力与完整细胞相同。根据组织化学鉴定、细胞器标志酶及细胞膜受体测定说明,用高渗法制备的脂肪细胞空泡主要成分是细胞膜,且保持了膜上受体的活力,适用于膜受体的结构和功能的研究。     

双盲交叉筛选分泌抗直肠腺癌神经节苷脂单克隆抗体杂交瘤细胞株PG 10

采用改良脾内免疫的方法,比较分析了甲、乙两组,经不同方法处理的直肠腺癌细胞株HR-8348的免疫效果(甲组未经酶处理;乙组用0.25％胰蛋白酶,37℃孵育20分钟)。实验结果表明:乙组对正常直肠和直肠腺癌神经节苷脂的阳性杂交瘤细胞集落数远远高于甲组。用分别分离、纯化自同一个体的正常直肠和直肠腺癌的神经节苷脂作检测抗原,交叉筛选出分泌抗直肠腺癌特异神经节苷脂单克隆抗体的PG10杂交瘤细胞株,经三次克隆,二次达百分之百阳性,培液中抗体的最高O.D.值(490nm)为1.85。描述了用双盲交叉法筛选抗直肠腺癌特异的神经节苷脂单克隆抗体的新方法。