WNK1基因不同转录本在小鼠肾脏中的表达及意义

目的研究WNK1基因长短两个转录本在小鼠肾脏组织中的表达分布特征,为进一步研究它们的生物学功能提供实验数据.方法 RT-PCR扩增两个转录本的特异性片段,Northern印迹杂交证实片段特异性后,将片段克隆入pGEM-T载体中,体外转录同位素标记的正义和反义RNA探针,在小鼠肾脏组织石蜡切片上进行原位杂交检测.结果 WNK1基因长转录本微弱广泛地表达在小鼠肾脏组织上,短转录本特异地表达在小鼠肾脏皮质部的远曲小管上.结论在肾脏,WNK1基因的短转录本是功能性转录本,其编码的蛋白质在生物学功能上可能与其它激酶不同.     

过量大黄对小鼠肝脏细胞的毒性作用

目的探讨不同剂量的大黄对小鼠肝脏细胞的损伤及其机理,为大黄的安全用药提供理论依据。方法采用大、中、小、最小剂量的大黄灌胃昆明小鼠,观察一般状态,进行肝脏组织切片HE染色、酶指标生化检测及TNFαmRNA半定量检测。结果①小鼠一般状况随大黄剂量的增加而恶化。②小鼠ALT及γ-GT随大黄剂量增加而增高,除正常对照组和最小剂量组外,其余各组之间差异均达显著水平。③从小剂量组开始,小鼠肝脏出现脂肪变性,且随大黄剂量增加而加重。④从小剂量组开始,TNFα表达明显升高,且随大黄剂量增加而增高。结论8g/Kg/d剂量大黄对肝脏具有毒害作用,毒害作用随大黄剂量增加而加剧,过量大黄对肝脏的毒害作用主要表现为肝细胞脂肪变性。TNFα参与了过量大黄对肝脏的毒害过程,是造成肝细胞脂肪变性的损伤因子之一。     

SH2A抑制IGFⅡ诱导的抗凋亡作用

为研究SH2A的生物学特性,构建野生型和缺陷型SH2A表达载体,通过流式细胞术和蛋白激酶C(PKC)活性检测,研究其对细胞凋亡的影响.研究结果显示SH2结构域是SH2A的主要功能域;SH2A可以诱导细胞快速进入凋亡晚期而促进细胞凋亡;同时发现SH2A抑制胰岛素样生长因子Ⅱ(Insulin-like growth factor Ⅱ,IGF Ⅱ)的抗凋亡作用,并阻滞IGFⅡ诱导的Ca2+释放和PKC激活.因此,SH2A可能通过抑制PKC信号通路而促进细胞凋亡.