细胞代谢过程分析方法及模型优化

细胞代谢是一个复杂的生物化学反应体系 ,可以在不同的水平上进行调控 ,如控制酶数量的翻译水平调控和调节酶活性的反应水平调控。细胞代谢为了一系列的特定目标而趋于最优化状态 ,如减少能量生产、减少ＮＡＤＰ的合成、增强氧气输送等等[1] 。在漫长的生物进化过程中 ,细胞已达到了这样的最优化状态。然而在一定的介质和条件下 ,生化反应中的微生物并不能充分发挥其潜在的全部催化活性 ,这是由于野生菌株还未能适应其新的目标———根据人类需要最大化生产或选择性生产特定物质。代谢工程通常被认为是“提高细胞活性的工程” ,是利用基因工…     

盐酸胍浓度对变性溶菌酶复性的影响

研究了复性液中盐酸胍浓度对变性溶菌酶复性的影响。变性酶的复性收率与复性液中盐酸胍度浓度紧密相关,获得高复性收率所需的盐酸胍浓度随酶浓度提高而增大。当酶浓度较低时（0．06－0．21g/L）,0．7mol/L的盐酸胍即可溶菌酶完全复性;当酶浓度较高时（0．6－1．05g/L）,提高盐酸胍浓度至1．0－1．5mol/L才可使复性收率达到95％以上。另外,酶的复性速率随盐酸胍浓度增大而下降。因此,根据酶浓度选择最佳盐酸胍浓度是提高蛋白质复性收率的关键。     

蛋白质复性

重组ＤＮＡ技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难 :很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶、人胰岛素、人生长激素、白介素 6、人γ 干扰素等 ,不仅不能分泌到细胞外 ,反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约 0 .1～ 3.0 μｍ的固体颗粒———包含体[1] 。这些基因表达产物的一级结构 (即氨基酸序列 )虽然正确 ,而其立体结构是错误的 ,所以没有生物活性。因此 ,为获得天然状态的目标产物 ,必须在分离回收包含体后 ,溶解包含体并设法使其中的目标蛋白质…