Gs蛋白alpha亚基与毒性多结节性甲状腺肿自主功能性的研究

目的：检测TMG (毒性多结节性甲状腺肿：Toxic Multinodular Goiter) 患者甲状腺细胞中的Gs琢基因突变情况,讨论其与 TMG 细胞自主功能性的关系。方法：将16 例TMG 患者手术切除标本中甲状腺结节组织及其作为对照组的结节周围正常的甲状 腺组织,分别于光镜电镜下观察细胞行为,提取DNA,对目的基因片段进行扩增聚合酶链反应(PCR)反应及DNA测序分析。结果： 于光镜及电镜下可观察到TMG细胞的滤泡大小不等,滤泡上皮呈高柱状,增生明显,粗面内质网高度扩张,高尔基体发达,核糖 体丰富,呈高功能状态。16 例TMG 标本中,5 例发现第10 外显子点突变,其中：2 例为第274 位的赖氨酸密码子AAG的第一个 碱基A的缺失,使对应赖氨酸表达异常,3 例为第279 位的天冬酰胺的密码子AAC 的第一个碱基A 的缺失,对应天冬氨酸表达 异常。对照组未发现Gs琢基因突变。结论：TMG 患者Gsalpha基因突变可导致Gs琢/TSHR/cAMP 信号通路异常,使细胞产生自主高功 能状态,是导致TMG 自主功能性发生的重要因素。     

细胞凋亡和代谢基因在转移倾向结肠癌中的研究

目的:应用基因微阵列技术初步筛选与不同转移倾向结肠癌相关的细胞凋亡和代谢相关基因,研究转移相关基因功能.方法:取结肠癌肝转移和无转移结肠癌组织,采用人全基因组表达谱芯片获得两组织的基因表达谱,分析比较两者之间细胞凋亡和代谢基因的差异表达情况;利用基因数据库检索结肠癌相关基因,分析基因功能.结果:应用含有16450个克隆(其中3869个未知)的cDNA微阵列分析发现,细胞凋亡或肿瘤相关基因中,2倍以上(Ratio值小于0.5或大于2.0)差异基因共216个,上调基因85个,下调基因129个.表达差异5倍以上(Ratio值小于0.2或大于5.0)共32个,上调基因10个,下调基因22个.在细胞代谢相关基因中,2倍以上(Ratio值小于0.5或大于2.O)差异基因共205个,上调基因86个,下调基因119个.表达差异5倍以上(Ratio值小于0.2或大于5.0)共15个,上调基因10个,下调基因5个.利用基因数据库检索分析发现5个基因与结肠癌转移关系密切.结论:结肠癌的发生和转移是多基因参与的,本实验应用基因微阵列技术发现细胞凋亡和代谢相关基因中发现5个基因与结肠癌转移关系密切.     

以化脓性肝脓肿为初始表现的原发性肝癌的临床特点及诊治体会

目的：探讨以化脓性肝脓肿（PLA）为初始表现的原发性肝癌（PLC）的临床特点,总结诊治体会。方法：回顾性分析哈尔滨医科大学附属第一医院肝脏外科2007年6月至2012年6月收治的10例以PLA为初始表现的PLC患者以及269例同期收入院的PLA患者的临床资料。结果：以PLA为初始表现的PLC患者可表现为发热、寒战、右上腹痛、恶心、呕吐、腹泻、体重减轻以及黄疸等。实验室检查显示以PLA为初始表现的PLC患者甲胎蛋白（AFP）和糖类抗原19-9（CA19—9）升高的比例显著高于PLA患者,但其他实验室检查的差异无统计学意义。患者除静脉抗生素治疗外均接受了有创治疗,生存时间最长为13个月,最短仅为2个月。结论：对于AFP及CA199升高的PLA患者要警惕伴发PLC的可能。肝脏增强CT检查对AFP及CA199正常的此类患者有较大的诊断价值。早期准确诊断,把握手术时机是提高此类患者预后的根本。     

毒性多结节性甲状腺肿的手术术式探讨

目的:探讨毒性多结节性甲状腺肿的手术切除范围,为临床手术治疗毒性多结节性甲状腺肿提供理论依据。方法:收集2006年12月至2011年12月哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外科确诊且进行手术的52例双侧毒性多结节性甲状腺肿患者的临床资料,并按照术式分为次全切除组(24例)和近全/全切除组(28例)。术后通过病理检查观察其合并甲状腺癌的情况,临床观察其是否出现声音嘶哑(喉返神经损伤)和低钙血症(甲状旁腺损伤)情况,并随访患者甲状腺结节和(或)甲状腺功能亢进的复发情况。结果:次全切除组甲状腺癌的检出率为4.2%(1/24),近全/全切除组检出率为7.1%(2/28),两者比较差异无统计学意义(x2=0.02,P0.05);两组患者术后暂时性声音嘶哑发生率分别为4.2%(1/24)、3.6%(1/28),差异无统计学意义(x2=0.37,P0.05),术后暂时性低钙血症发生率分别为4.2%(1/24)、7.1%(2/28),差异亦无统计学意义(x2=0.02,P0.05)。近全/全切除组患者术后无甲状腺结节和(或)甲状腺功能亢进复发,次全切除组患者有5例复发,复发率为20.8%(5/24),两组比较差异有统计学意义(x2=4.28,P0.05)。结论:甲状腺近全/全切除术比次全切除术更能减少毒性多结节性甲状腺肿的复发。     

TLR4在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达

目的：检测Toll样受体4（TLR4）在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达,为进一步研究肝硬化时骨髓损伤的发生机制提供实验依据。方法：选择Wistar大鼠给予腹腔注射CCl4,一周两次,建立肝硬化大鼠模型。分别于建模8周和12周检测大鼠血浆内毒素的水平,免疫组化检测大鼠骨髓血窦内皮细胞上TLR4的表达情况,RT-PCR测定骨髓组织中TLR4mRNA的表达,分析TLR4的表达与内毒素血症间的关系。结果：给予CCl4 8周和12周时,对照组大鼠血浆内毒素水平分别为（0．216±0．024）Eu／ml和（0．133±0．022）Eu／ml,模型组大鼠血浆内毒素水平分别为（0．626±0．021）Eu／ml和（0．725±0．031）Eu／ml,分别较对照组显著升高,差异均有统计学意义（P〈0．001）;骨髓血窦内皮细胞TLR4蛋白表达及骨髓组织中TLR4mRNA的表达均显著高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。大鼠骨髓TLR4蛋白和mRNA表达与血浆内毒素水平均呈显著正相关（r=0．841,0．803,P均〈0．001）。结论：CCl4诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞TLR4表达升高,并伴随大鼠内毒素血症的发生,提示肝硬化时肠源性内毒素血症可能参与了骨髓的造血功能的损害和病变。     

TLR4 在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达

目的：检测Toll样受体4(TLR4)在四氯化碳诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞的表达,为进一步研究肝硬化时骨髓损伤 的发生机制提供实验依据。方法：选择Wistar大鼠给予腹腔注射CCl4,一周两次,建立肝硬化大鼠模型。分别于建模8 周和12 周 检测大鼠血浆内毒素的水平,免疫组化检测大鼠骨髓血窦内皮细胞上TLR4 的表达情况,RT-PCR 测定骨髓组织中TLR4 mRNA 的表达,分析TLR4 的表达与内毒素血症间的关系。结果：给予CCl4 8 周和12 周时,对照组大鼠血浆内毒素水平分别为(0.216± 0.024) Eu/ml 和(0.133± 0.022) Eu/ml,模型组大鼠血浆内毒素水平分别为(0.626± 0.021) Eu/ml 和(0.725± 0.031) Eu/ml,分别较对 照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.001);骨髓血窦内皮细胞TLR4蛋白表达及骨髓组织中TLR4 mRNA的表达均显著高于 对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。大鼠骨髓TLR4 蛋白和mRNA表达与血浆内毒素水平均呈显著正相关（r=0.841,0.803,P 均<0.001）。结论：CCl4 诱导的肝硬化大鼠骨髓血窦内皮细胞TLR4 表达升高,并伴随大鼠内毒素血症的发生,提示肝硬化时肠源 性内毒素血症可能参与了骨髓的造血功能的损害和病变。     

三元基序家族蛋白15敲低诱导肝癌细胞周期阻滞

三元基序家族蛋白15 (tripartite motif-containing protein 15,TRIM15)是TRIM家族成员,该家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质.TRIM15在肿瘤中的功能鲜有报导.本研究意在阐释TRIM15在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用...     

敲低序列相似家族172成员A 抑制肝癌细胞增殖和糖酵解

序列相似家族172成员A(family with sequence similarity 172 member A, FAM172A)已被证实与多种肿瘤的发生和恶性转化有关，但是FAM172A在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的作用尚不完全清楚。本研究分析了肿瘤与癌症基因组图谱数据库中50例正常肝组织和50例肝癌组织信息，结合实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹结果，发现肝癌组织中FAM172A的表达高于正常肝组织。利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)将肝癌细胞系中FAM172A进行敲低，细胞活力检测和细胞克隆形成实验结果表明，FAM172A的敲低显著抑制了细胞的增殖(P<0.01)。此外糖酵解压力测试和Western印迹结果显示，敲低FAM172A可以有效抑制肝癌细胞的糖酵解能力，糖酵解酶己糖激酶2(hexokinase 2, HK2)、肝内磷酸果糖激酶(phosphofructokinase-liver, PFKL)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A, LDHA)及其转录因子c-M...