CD／5-FC自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞影响的离体研究

在离体条件下探讨CD/5 FC自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞的抗癌作用。通过将CD基因插入真核表达载体pcDNA3.0多克隆位点构建pCMVCD表达质粒 ,采用限制性内切酶消化鉴定所构建的质粒 ,并进行CD基因测序。采用LipofectAMINE2 0 0 0脂质体介导法将CD基因转染U2 5 1恶性人脑胶质瘤细胞 ,G4 18筛选获得抗性克隆 (取名为U2 5 1/CD细胞 ) ,使用不同浓度的 5 FC作用于U2 5 1/CD细胞 ,MTT法测定活性细胞比率。采用高效液相色谱法 (HPLC)检测 5 FC培养液内 5 FU的浓度。结果如下 :真核表达质粒pCMVCD构建成功 ,并通过酶切鉴定。U2 5 1细胞获得了质粒的成功转染。未转染的U2 5 1细胞对 5 FC不敏感 ,IC50 约为 6 5 0 0 μmol/L ,而转染基因后IC50 约为 10 μmol/L。基因转染使G4 18抗性细胞(U2 5 1/CD细胞 )对 5 FC高度敏感。并且加入不同浓度的 5 FC后 ,U2 5 1/CD细胞培养液内均能检测到 5 FU。实验结果表明 :CD/5 FC系统可以用于胶质瘤的治疗 ,CD基因修饰U2 5 1细胞及其表达的离体研究为胶质瘤基因治疗的在体研究提供依据。     

一种硬膜外局部低温方法的降温效能和安全性研究

目的应用自制降温线圈发展一种硬膜外局部低温治疗方法,对其降温效能和安全性进行评估。方法SD大鼠随机分为常温对照组（Nor组）、硬膜外局部低温组（LH组）和全身低温组（SH组）,对LH组和SH组分别实施硬膜外局部降温和全身降温,观察降温前后同侧脑温、对侧脑温、肛温以及呼吸、心率、血压变化,降温后24h对各组大鼠进行神经功能评测,取脑组织标本行光镜、电镜检查,并检测脑组织水、钠、钾离子含量和血脑屏障通透性。结果降温后,LH组大鼠的降温侧脑温在数分钟内从（36．5±0．3）℃下降到（31．4±0．4）℃并维持稳定,其对侧脑温和肛温无明显下降,R、HR和MABP无明显变化;SH组降温后双侧脑温、肛温均出现降低,降温后HR下降。降温后,LH组和SH组大鼠神经功能评分正常,光镜和电镜下脑组织无损伤表现,其脑组织水、钠、钾离子含量和血脑屏障通透性与常温对照组比较无统计学差异。结论应用这种硬膜外局部低温方法可以达到与全身降温一样的效果,且不会引起生命体征波动及对脑组织产生急性损害。     

硬膜外局部低温与全身低温并发症的对比研究

目的:探讨硬膜外局部低温的并发症情况.方法:SD大鼠随机分为常温对照组(Nor组)、硬膜外局部低温组(LH组)和全身低温组(SH组),LH组以自制降温线圈贴附于一侧硬膜外实施局部低温,SH组以冰袋和酒精全身降温,两组均使脑温降至31.0-32.0℃并持续10小时.实验中观察大鼠寒战反应,监测脑温、肛温及呼吸、心率、血压变化,于降温末取血进行血气分析、电解质、血常规及血液流变学检测.结果:降温后,LH组和SH组脑温均下降到目标温度并维持稳定.降温过程中,SH组寒战发生率为57.1%,且出现心率下降,血小板降低,高切变率全血粘度和血浆粘度增高,LH组未观察到如上变化.结论:硬膜外局部降温可达到与全身降温一样的降温效果,而与全身低温相比,硬膜外局部低温并发症更少.     

鞍区HRCT扫描在单鼻孔蝶窦入路切除垂体腺瘤中的作用

目的:探讨术前鞍区HRCT扫描在单鼻孔蝶窦入路切除垂体腺瘤中的作用.方法:回顾性分析42例经单鼻孔蝶窦入路垂体腺瘤切除病人鞍区薄层HRCT检查的结果和经验.结果:蝶窦呈鞍彤35例,鞍前形7例,鞍底骨质破坏19例.术后鞍底骨窗均小于1.5 cm × 1.5cm.肿瘤全切除28例,次全切除10例,部分切除4例.术后视力及视野改善者31例,内分泌指标恢复正常者35例.术后脑脊液鼻漏5例.本组无死亡病例,没有出现因骨窗咬除而出现的视神经损伤、海绵窦出血等并发症.结论:鞍区薄层HRCT检查有利于指导手术入路的设计和术中手术方位的判断.