我国新分离乙型脑炎病毒株毒力特征研究

将分离自不同年代的17株乙脑毒株在小鼠脑内传代,然后将病毒在BHK21细胞单层上观察不同毒株的空斑形成大小形态,小鼠脑内和皮下途径接种观察病毒的毒力,结果显示不同毒株在BHK21细胞上形成的噬斑大小不尽相同,减毒株形成的噬斑最小。所有毒株对小鼠的脑内毒力都很强,病毒滴度高达lg8.0/mL以上,毒株间无明显差异。毒株对9～11g小日龄小鼠的皮下毒力有一定差异但不明显,但对14～16g较大日龄小鼠则差别明显。PFU/LD50的对数值差异除一株(M47株)为8.44外,其余各株差别在3.94～0.45间。本研究结果证明自然界乙脑毒株存在明显的神经外毒力差异,毒力差异与分离年代和病毒基因型无关,但从人体分离到的毒株毒力表现较强。     

首批人抗乙型脑炎病毒血清候选国家标准品的研制

目的 研制首批人抗乙型脑炎病毒血清候选国家标准品,用于乙型脑炎病毒中和抗体检测和乙型脑炎疫苗免疫效果评价。方法 采用乙型脑炎病毒中和抗体阳性的人血浆为原料,去除纤维蛋白原、灭活补体后分装冻干制成人源抗乙型脑炎病毒血清国家标准品。组织2家单位协作标定,并对候选标准品进行稳定性观察。结果 研制批号为201801人抗乙型脑炎病毒血清候选标准品共5 000余支;其外观、水分、无菌检查和分装精度等均符合《中华人民共和国药典》2020版(三部)要求。人源抗乙型脑炎病毒血清国家标准品中和抗体效价赋值为1∶123.8～1∶202.2,且在4℃保存3年中和抗体效价稳定。结论 该批人抗乙型脑炎病毒血清可作为国家标准品用于乙型脑炎疫苗临床血清中和抗体效价检测和乙型脑炎疫苗质量控制。     

一株强神经毒力乙脑病毒株的生物学及其分子特征

研究一株神经毒力很强的乙型脑炎病毒株SA4株的生物学特性并进行基因组全序列分析,并找到其毒力强的分子基础。将SA4脑内接种昆明小鼠后每日观察发病和死亡鼠数并每日收取鼠脑,用空斑法检测接种后不同时间点的脑内病毒增殖滴度,同时以另一株乙脑病毒SA14按照相同方法进行平行实验作为对照。SA4株的全基因组测序序列结果与乙脑SA14株及世界各地共21株乙脑病毒的全基因组序列进行比较。结果显示,脑内接种SA4株的小鼠发病和死亡时间均比SA14株早1d,在相同时间点上SA4株的病毒滴度高0.5～1.0lgPFU/mL。SA4株与世界各地毒株基因同源性比对,核苷酸同源性为84.6%～99.0%,氨基酸同源性为95.2%～99.7%。与SA14相比,氨基酸序列存在17个位点的差异,分布于不同的区段,其中E区最多,为5个。证明SA4是一株在脑内具有较快繁殖力的神经毒力很强的毒株,其序列上17个氨基酸位点的替换很可能是其强神经毒力的分子基础。