抗Trx单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究

目的：建立双抗体夹心ELISA 法检测日本血吸虫硫氧还蛋白（Thioredoxin,Trx）。方法：用重组日本血吸虫Trx（rTrx）蛋白免疫BALB/c 小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法。通过检测日本血吸虫排泄- 分泌物（excretorysecretions,ES）与rTrx的浓度评价该方法的敏感性;通过对健康人血清的检测确定其特异性;通过对布氏姜片吸虫病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、囊虫病患者血清进行交叉反应试验,评价该方法的特异性。结果：获得2 株稳定分泌抗rTrx 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为McTrx1 和McTrx2。以McTrx1 为包被抗体,HRP-McTrx2 为酶标抗体,建立的双抗体夹心ELISA 可检测出ES的最低浓度为4.8 μg/ml,检测出rTrx 的最低浓度为1.2 滋g/ml。该方法的特异性为96 %。结论：以抗rTrx 蛋白单克隆抗体McTrx1 与McTrx2为基础建立的双抗体夹心ELISA 法具有较高的特异性。