预血管化细胞膜片的构建

为探索新的体外获得毛细血管样网络结构来解决工程化组织预血管化的问题,该研究将人骨髓间充质干细胞（humanmesenchymalstemcells,hMSCs）以9×10^4／cm。细胞密度体外连续培养形成细胞膜片,将培养的脐静脉血内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs）v25x104／cm2细胞密度接种到上述间充质干细胞膜片上,并培养在内皮细胞培养介质中。在设计的时间点用倒置相差显微镜观察,发现内皮细胞在膜片上迁移,细胞重排,膜片上的基质蛋白也发生重排．导致微槽和空泡出现。CD31免疫荧光染色观察到进行性管腔形成的过程;CD90免疫荧光染色显示膜片上的hMSCs围绕着HUVECs周边排列,说明hMSCs作为周细胞支持了HUVECs的生长;在培养第10d可见少量的α-SMA的表达,暗示着在此种培养模式下,hMSCs具有较低的向肌细胞分化的潜能。这些结果表明,将内皮细胞接种在未分化干细胞膜片上,可以在体外形成具有血管网络结构的预血管化膜片,为构建血管化工程化组织提供了新的思路。     

血小板浓缩生长因子对正畸大鼠牙移动及牙周组织CCR-1和HO-1表达的影响

摘要 目的：研究血小板浓缩生长因子（concentrated growth factors, CGF）对正畸大鼠牙移动及牙周组织CC类趋化因子受体-1（CC chemokine receptor-1, CCR-1）及血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）表达的影响。方法：150只大鼠随机分为对照组和观察组,每组75只,两组均建立正畸牙移动模型,观察组每日腹腔注射10 % CGF生理盐水溶液,对照组注射等体积生理盐水溶液,共注射14 d。分别检测第0 d、1 d、3 d、7 d和14 d两组大鼠的牙移动距离,TRAP染色并进行破骨细胞计数,检测牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达。结果：随正畸力作用时间的延长,两组大鼠牙移动距离均显著增长、破骨细胞计数显著增多、牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达均显著升高（P＜0.05）;对照组与观察组在第1 d和第3 d时牙移动距离相比无统计学差异（P＞0.05）,而在第7 d开始,观察组牙移动距离显著长于对照组（P＜0.05）;观察组大鼠破骨细胞计数和牙周组织中CCR1和HO-1 mRNA的相对表达均显著高于同时间点的对照组（P＜0.05）。结论：CGF可促进正畸大鼠牙移动,增加破骨细胞数量,从而促进正畸牙移动和牙周组织重建,其机制可能与增加牙周组织中CCR1和HO-1的表达水平有关。     

预血管化细胞膜片的构建

为探索新的体外获得毛细血管样网络结构来解决工程化组织预血管化的问题,该研究将人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)以9×104/cm2细胞密度体外连续培养形成细胞膜片,将培养的脐静脉血内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)以5×104/cm2细胞密度接种到上述间充质干细胞膜片上,并培养在内皮细胞培养介质中。在设计的时间点用倒置相差显微镜观察,发现内皮细胞在膜片上迁移,细胞重排,膜片上的基质蛋白也发生重排,导致微槽和空泡出现。CD31免疫荧光染色观察到进行性管腔形成的过程;CD90免疫荧光染色显示膜片上的hMSCs围绕着HUVECs周边排列,说明hMSCs作为周细胞支持了HUVECs的生长;在培养第10 d可见少量的α-SMA的表达,暗示着在此种培养模式下,hMSCs具有较低的向肌细胞分化的潜能。这些结果表明,将内皮细胞接种在未分化干细胞膜片上,可以在体外形成具有血管网络结构的预血管化膜片,为构建血管化工程化组织提供了新的思路。