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NAD激酶能催化NAD生成NADP。本研究采用PCR技术从嗜热脂肪地芽孢杆菌基因组中获得NAD激酶基因,以pET30a(+)为表达载体、E.coliBL21(DE3)为宿主菌,实现其在大肠杆菌中异源表达,并进行酶学性质研究。结果显示,嗜热脂肪地芽孢杆菌中NAD激酶编码基因大小为816bp,酶分子量大约为35kD。酶学性质分析表明,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌的NAD激酶最适反应温度和pH分别为35℃、pH7.5,在35qC中保温2h后仍能保持80%左右的活性。Mn2+、Ca2+对该酶有较强的激活作用,在最适反应条件下该酶的比活力为4.43U/mg。动力学性质分析结果显示NAD激酶对底物NAD催化的k和圪。,分别为1.46mmol/L和0.25tzmol/(L·min)。NAD激酶在大肠杆菌的异源表达为以NAD为底物生物合成NADP提供了更多生物资源。 相似文献
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