毛木耳子实体中活性多糖APPⅡA的分离纯化与结构初探

毛木耳Auricularia polytricha子实体500g经热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白后,得到粗多糖3.94g,得率为0.79%。经小鼠S180载体实验证实,50mg/kg该粗多糖对肿瘤的抑制率达47.89%,呈极显著差异。利用离子交换柱对其进行分离,共得到三个部分,分别命名为APPⅠ、APPⅡ、APPⅢ。其中,APPⅡ对小鼠S180的抑制率达到56.36%,明显优于其他两部分。通过SephacrylS300凝胶过滤层析柱后,APPⅡ被进一步分离为A和B两个部分,APPⅡA的抑瘤率为53.61%,远高于APPⅡB,呈极显著差异。通过紫外光谱、红外光谱等方法对该单一多糖组分进行结构分析,表明APPⅡA为一相对分子质量约为110,000Da、可能同时具有α和β构象的杂多糖,主要有木糖和甘露糖组成,且纯度较高,含有硫酸基。     

毛木耳Auricularia polytricha多糖APPIIA对巨噬细胞细胞因子和iNOS基因表达的影响

从毛木耳Auricularia polytricha子实体中分离得到了具有抗肿瘤作用的单一多糖组分APPIIA,采用SYBR Green I指示的Real-time RT-PCR技术研究了它对小鼠巨噬细胞RAW 264.7中IL-1β,IL-6,TNF-α和一氧化氮(NO)合成关键酶iNOS基因在mRNA转录水平上的作用。采用Western-Blot技术,研究了APPIIA对RAW 264.7细胞生成iNOS蛋白的能力。研究发现,APPIIA能增强IL-1β,IL-6,TNF-α和NO合成关键酶iNOS基因的转录水平,并能增加iNOS蛋白的生成。推测APPIIA可能通过上调相关基因的表达,增加IL-1β,IL-6,TNF-α分泌和NO生成,从而实现其抗肿瘤的重要作用。