罗非鱼TRAF3基因的表达及功能研究

肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关因子3(TRAF3)是多种免疫途径中的关键调控因子。从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)中克隆获得了TRAF3基因, 命名为OnTRAF3(GeneBank No. MN258118), 该基因包含1个环指结构域、1个锌指结构域、1个卷曲螺旋和MATH结构域。多序列比对表明, OnTRAF3与其他已知的TRAF3蛋白具有高度的相似性, 尤其是MATH结构域。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示, OnTRAF3在各组织中广泛分布, 且在脑、皮肤、肠和鳃中表达量较高。在无乳链球菌诱导后, 多个组织中的OnTRAF3表达量出现了不同程度的上调, 说明OnTRAF3参与了罗非鱼的抗菌免疫应答。亚细胞定位实验显示, OnTRAF3分布在HEK293的细胞质和细胞核中。此外, 荧光素酶报告基因实验结果显示, 野生型(WT)OnTRAF3可显著激活NF-κB信号, 而coiled-coil和MATH 结构域缺失后, 依然能够显著激活NF-κB 活性, 而RING 和Zinc缺失后, 该激活作用则明显减弱, 表明RING 和Zinc 结构域是OnTRAF3在免疫信号通路中行使功能的关键结构域。研究为探索TRAF3在罗非鱼免疫应答中的功能提供了重要的基础。     

SRY盒基因在斑马鱼和胡子鲇中的保守性分析

本文采用人类SRY基因探针,与EcoRI消化的中国的胡子鲇(Clarias fusc us)和美国的斑马鱼(Brachydanio rerio)基因组DNA进行了Southern印迹杂交分析。首次在这两种鱼中发现了SRY盒基因及其存在特征;在斑马鱼中发现了明显的限制性片段长度多态性; 并深入分析了SRY盒基因的进化保守性。 Abstract:Using,Southern bloting analysis,EcoRI-digested genomic DNA from Clarias fuscus and Brachydanio rerio were hybridizae to human SRY probe.Hybridization occurred in both male and female of the two species.RFLP associated with SRY-box genes was observed in Brachydanio rerio.The conservation of SRY-box genes was analysed.     

用地高辛标记原位杂交技术定位黄鳝rRNA基因于二价染色体3q12—q24和7…

以地高辛标记重组质粒ＰＴＡ７１中所含的小麦ｒＲＮＡ基因作为探针,与ＥｃｏＲＩ酶切的黄鳝核基因组点ＤＮＡ经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,呈现２条带,片段长度分别为１２．８ｋｂ和４．６ｋｂ。再运用染色体原位杂交技术及杂交一多重带显带技术,定位ｒＲＮＡ基因于黄鳝二价染色体３ｑ１２－ｑ２４和７ｑ１４－ｑ２６两个区间,其分布位点与硝酸银染法结果相符。此外,还讨论了在黄鳝二价体上开展基因定位研究的突出优点。     

Herbicidal Activity of Toxin from Fusarium avenaceum GD-2 against Wild Oats (Avena fatua L.)

The herbicidal activity potential of toxin from Fusarium avenaceum GD-2 was evaluated against wild oats (Avena fatua L.) in this study. The toxin was assayed in vitro to evaluate its inhibition against seed germination of A. fatua. The toxin of F. avenaceum GD-2 was shown to have an inhibitory effect of around 77.54% at 5 mg/mL against germination of A. fatua seeds. The inhibitory effect shown by the toxins against radicle had higher activity than plumule under the same concentration. The toxin of F. avenaceum GD-2 significantly diminished the plant length the part on the ground with various treatments when treated with the toxin under greenhouse conditions. However, there were no significantly different reductions in plant length and the weed fresh weight with different treatments. In detached leaf injection bioassay, the toxic metabolite was characterized after the culture filtrates crude extraction with petroleum ether, chloroform, ethyl acetate and n-butanol. The residues left after solvent evaporation were evaluated separately for their toxicity against the target weed. Residue (5 mg/mL) obtained from n butanol fraction showed the highest toxic activity when compared with others. Moreover, a host range experiments on the sensitivity of 10 plant species revealed that barnyard grasses and goosefeet were more sensitive to the toxin of the culture filtrate. Three herbicidal active compounds were isolated and purified from cultural filtrate with the same UV absorption peak. The recent results showed potential for the development of the toxins produced by F. avenaceum GD-2 as a bio herbicidal source to control and eliminate A. fatua weed.     

人工湿地系统对污水磷的净化效果

建立以亚热带湿生、水生植物为主的十二套下流行一上流－上行流人工湿地系统作为处理城镇生活污水的对策。以其中四套研究其在不同的水力负荷及气候条件下对污水中磷的去除效果。人工湿地系统随处理运行时间的推移趋于稳定,对污水中的总磷、无机磷显示较好的净化效率,平均去除率在冬季达到４０％以上,夏季达到６０％以上,出水达到国家地面水Ⅲ级标准。水生植物在系统中起到明显作用,有植物系统的除磷效率及稳定性均高于无植物对照,其中２号茭白－石菖蒲系统的效果最好,总磷平均去除率为６５％。４号9蔗－苔草系统在高水力负荷下的净效果优于２号。水力负荷的增加对系统的净效果没有明显影响。     

具有内含子的大鳞副泥鳅Sox8基因(英文)

鱼类在脊椎动物系统进化过程中起着承先启后的作用,其性别决定具有原始性、多样性和可塑性。深入研究鱼类的性别决定和分化具有重大的理论意义。Ｓｏｘ基因家族是九十年代发现的一个新的基因家族,其中的许多成员都与性别决定和分化具有直接的关系。大鳞副泥鳅是一种常见的小型鱼类,属于鲤形目鳅科,是少数具有异形性染色体中的一种。本文根据已发表的Ｓｏｘ蛋白质的序列资料,选择在不同物种中保守程度最高的区段设计兼并引物。该组引物可以特异扩增 Ｓｏｘ基因的 ＨＭＧ盒区。以大鳞副泥鳅基因组 ＤＮＡ为模板,在扩增产物中有三条主带,其大小分别为２２０ｂｐ,５５０ｂｐ和１５００ｂｐ,另有一条相当弱的带,大小为７００ｂｐ（Ｆｉｇ．１）。雌雄个体中扩增结果一致。经克隆和ＤＮＡ序列分析,从５５０ｂｐ扩增带中得到一新的基因片段,长５００ｂｐ,编码５３个氨基酸;其余部分长３４０ｂｐ,可能为一内含子,且符合“ＧＴ…ＡＧ”规律（Ｆｉｇ．２）。其可能编码的蛋白质氨基酸序列与小鼠的 Ｓｏｘ８, ９, １０,ＳＲＹ基因的相似性分别为 ９６％, ９４％, ９０％和 ４７％;与人类 Ｓｏｘ ８, ９, １０, ＳＲＹ基因的相似性分别为６４％, ９４％, ５８％和４０％（Ｆｉｇ．３）。     

黑斑蛙骨髓细胞染色体标本制备的新方法

染色体标本制备是黑斑蛙分子细胞遗传学研究的基础。为了简化操作程序,缩短实验周期,建立了黑斑蛙染色体制备的一种新方法——骨髓细胞体外短时培养与秋水仙素同步处理法。该方法操作简便,重复性较好,可在较短时间里制备出分裂相较多且形态良好的蛙染色体标本,适用于核型分析、染色体荧光原位杂交、染色体显微分离和单染色体文库构建等多个方面的研究。     

鱼类染色体BSG-G显带法

鱼类染色体多重带技术的应用,对鱼类遗传变异、分类进化、基因定位、基因表达与调控等问题的深入研究,显得日益重要。然而,鱼类染色体的多重带显带一直是个尚未过关的技术难题。近年来,许多学者尤其是国内学者在这个领域中进行了很多探索,并已取得一定进展。鉴于鱼类染色体短小,中期染色体螺旋     

黄鳝二价体上微量DNaseⅠ敏感性和限制性内切酶原位切割分析

采用DNase Ⅰ超敏感性分析和限制性内切酶介导的原位切口平移技术(Restriction Enzyme Nick Translation,RE-NT)对黄鳝二价体基因组结构进行了分析研究。已知DNaseⅠ超敏感性与潜在活性基因分布密切相关。结果表明,经DNaseⅠ介导的原位切口平移处理,在黄鳍二价体上可展现类D带带型,而由限制性内切酶介导的原位切口平移结果显示,AluⅠ和MspⅠ均在黄鳝二价体上诱导产生类G带带型,HpaⅡ和HaeⅢ则优先切割5号二价体上一特定区域,诱导出一段由标记信号所构成的类C带,对上述结果进行了分析和讨论。     

黄鳝二价体上微量DNaseI敏感性和限制性内切酶原位切割分析

采用ＤＮａｓｅＩ超敏感性分析和限制性内切酶介导的原位切口平移技术（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＥｎｚｙｍｅＮｉｃｋＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎ,ＲＥ－ＮＴ）对黄鳝二价体基因组结构进行了分析研究,已知ＤＮａｓｅＩ超敏感性与潜在活性基因分布密切相关,结果表明：经ＤＮａｓｅＩ介导的原位切口平移处理,在黄鳝二价体上可可展现类Ｄ带带型,而由限制性内切酶介导的原位切口平移结果显示,ＡｌｕＩ和ＭｓｐＩ均在黄鳝二价体上诱导产