培养的新生大鼠交感神经元膜电学性质及电压门控通道的膜片箝研究

在培养的新生大鼠颈上神经节交感神经元标本上,用全细胞电流箝及电压箝技术观察记录了交感神经元膜电学参数及电压门控性通道电流。用全细胞电流箝测得下列平均值：静息电位,－５１±６ｍＶ;输入阻抗,１４３２±３８９ＭΩ;时间常数,１３０±３２ｍｓ;动作电位幅度,９６±１０ｍＶ,超射值,４２±６ｍＶ。培养早期即可记录到自发或诱发的动作电位,大多数动作电位后跟随快或慢的后超极化电位。在电压箝状态下可分别记录到电压门控钠、钾、钙通道电流。钾电流以延迟整流型为主,钙电流只有高电压激活,缓慢失活的Ｌ或Ｎ型,未能记录到低电压激活,快速失活的Ｔ型钙电流。     

适于电生理学研究的新生大鼠中枢神经元培养

将分散的新生大鼠皮层神经元种在预先已培养了１０－１４ｄ的胶质细胞上,可使接种密度降至２．５×１０５／ｍｌ,同时细胞呈分散状生长,利于进行电生理学研究。采用膜片钳技术,在膜片钳放大器上记录了培养神经元的电生理特性,证明在未实验提供的培养条件下,神经元生长良好,保持了很好的生理功能。     

适用于膜片钳研究的新生大鼠骨骼肌细胞培养

采用低浓度胰蛋白酶,较低温度下长时间搅拌及粗口径滴管分次吹打等改进方法进行新生大鼠骨骼肌细胞分散培养,能够得到较高的细胞产率。经１０ｎｍｏｌ／Ｌ秋水仙碱处理３ｄ后可得到肌球,能够适合于进行膜片钳记录,并不改变肌细胞的电生理学特性,肌球膜上有正常的Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋和Ｎ型乙酰胆碱受体离子通道活动。本方法提供了一个较好的适用于肌细胞电生理学研究的模型。