基因工程抗体的性质及应用前景

一、基因工程抗体的理化 及生物学性质 如果需要全抗体分子,目前仍主要选用哺乳动物细胞表达的,而抗体片段则主要用大肠杆菌或噬菌体所表达的。在诊断及治疗,特别是肿瘤的诊断及治疗上,功能抗体片段显示其特殊的优越性。小鼠IgA PMC 603在与抗原结合时或不与抗原结合时的晶体结构已研究得很清楚。通过对这个抗体的研究,掌握了抗体各个区段的基本特征。 1.嵌合抗体(Chimeric antibodies) 嵌合抗体的制作通常是把分泌高亲和力抗体的鼠杂交瘤细胞林中分离到的V基因(VH和VL)连接起来,在骨髓瘤或杂交瘤细胞内表     

Identification and characterization of scaffold-associated region (SAR) of rRNA gene of silkworm Attacus ricini

Ｓｃａｆｆｏｌｄａｓｓｏｃｉａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ(ＳＡＲ)ａｎｄｍａｔｒｉｘａｔｔａｃｈｍｅｎｔｒｅｇｉｏｎ(ＭＡＲ)ａｒｅｋｎｏｗｎａｓｃｉｓａｃｔｉｎｇＤＮＡｅｌｅｍｅｎｔｓ,ｗｈｉｃｈｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙｂｉｎｄｔｏｎｕｃｌｅａｒｓｃａｆｆｏｌｄｏｒｎｕｃｌｅａｒｍａｔｒｉｘ.ＳＡＲ/ＭＡＲａｒｅｕｓｕａｌｌｙ300—1000ｂｐｌｏｎｇ,ＡＴｒｉｃｈ,ａｎｄｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅＩＩｃｏｎｓｅｎｓｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｏｔｈｅｒＡＴｒｉｃｈｓｅｑｕｅｎｃｅｍｏｔｉｆｓ[1].…     

基因工程抗体的获得

一、抗体结构和抗体基因 1.抗体结构 抗体分为五类,即IgG、IgM、IgA、IgD和IgE,其理化性质各不相同,在体内的比例、分布及代谢速率也很不一样。IgG是最重要的血清免疫球蛋白,分为四种亚型:IgG1是主要的亚型(占IgG总量的67％),其次是IgG2、IgG3、IgG4。IgA是主要的分泌型Ig,分为IgA1,IgA2两个亚型。IgM是一五聚体分子,由10条H链、10条L链和一条J链通过二硫键连接而成。它是一个多价体。在B细胞膜上的IgM作为抗原受体与B细胞成熟、分化有关。     

蓖麻蚕rDNA基因核骨架结合区在酵母中的自主复制功能

蓖麻蚕核糖体ＲＮＡ基因（ｒＤＮＡ）５′－非转录间隔区有长约１ｋｂ的核骨架结合区ＳＡＲ（ｓｃａｆｏｌｄ－ａｓｓｏｃｉａｔ－ｅｄｒｅｇｉｏｎ）［１］。本文对该ＳＡＲ元件的酵母自主复制功能进一步研究,证明该ＳＡＲ５′端６８８ｂｐ含有１２个ＡＣＳ（ＡＲＳ的核心序列）同源序列,但无ＡＲＳ活性,而其３′端仅３个ＡＣＳ同源序列,但对酵母的转化率比全片段还高４０～５０倍。体外结合实验证明,蓖麻蚕ｒＲＮＡ基因的ＳＡＲ能专一地同酵母核骨架结合,提示ＡＲＳ的功能体现与核骨架结合紧密相关。ｒＲＮＡ基因ＳＡＲ与ＡＲＳ的功能在进化上可能是很保守的。在此基础上可进一步分析ＳＡＲ中与ＤＮＡ复制相关的正调及负调元件。     

蓖麻蚕rDNA转录起始区核酸酶S1的敏感位点的特征结构

曾报道,蓖麻蚕rRNA基因的非转录间隔区内有1个单链核酸酶S1的超敏感位点,它具有d(AT)₁₈的特征结构^[1] .蓖麻蚕经饥饿,再食后.发现在该S1超敏感位点的下游还存在1个敏感位点,而在饥饿的情况下,未能检测到染色质上的这个敏感位点^[2].新确定的这个可诱导的单链核酸酶的敏感位点,它是一个d(GT)₁₀…d(AT)₁₀的特殊结构,具有易解链的特征.这个新确定的核酸酶S1的敏感点结构可能直接参与了rDNA的转录和复制的调控.     

核骨架与真核基因复制起点

一、核骨架 核骨架(nuclear scaffold)又名核基质(nuclear matrix,NM),是细胞核内一种动态亚组分结构,其功能是将DNA组织成相对独立的区域(domain),并为其提供专一性的转录、复制及RNA加工的控制位点。它在形态上为一种细胞核内不溶的骨架网络,包括核纤层(lamina)、内层蛋白纤维颗粒、残留的核仁和核孔复合体。它普遍存在于真核细胞中,维持了细胞核的基本形态。     

人细胞周期相关激酶启动子的克隆和初步分析

克隆人的细胞周期相关激酶(CCRK)基因启动子,分析与其表达有关的转录调控因子。通过巢式PCR方法,从人的基因组总DNA中分离出CCRK基因5′端非翻译区大小为1072bp的片段。这段片段的3′端起始点在第一个外显子里第一个翻译密码子ATG( 1)上游128bp处。以1072bp为模板,对启动子进行5′端删除分析,分别扩增951bp(-1072／-128)、564bp(-692／-128)、313bp(-441／-128)、127bp(-239／-128)的片段,与pGL3-Basic荧光素酶报告载体重组构建,人工加上克隆位点,5′端带有KpnI、3′端带有XhoI位点。瞬时转染恶性神经胶质瘤细胞株U373,通过双荧光素酶活性进行分析。对分离出的1072bp的片段进行测序,结果与GenBank(Accession AF035013)的序列比较,同源序列达到98％。双荧光素酶活性分析564bp片段有最强的活性,313bp片段为有活性的最小片段。本研究为进一步研究分析CCRK的核心启动子和与其相关的转录因子奠定基础。     

蓖麻蚕rDNA5‘—非转录间隔区的DNA序列及结构特征

我们测定了蓖麻蚕ｒＤＮＡ５‘－非转录间隔区ＳａｃⅡ－ＥｃｏＲＩ片段的ＤＮＡ序列,它的长度为１０２５ｂｐ,Ａ＋Ｔ含量大于７０％。本文报道该片段的序列特征,用计算机对其内所具的结构基序进行分析结果说明。其中含有多个与核骨架结合区有关的结构基序和酵母自主复制序列的核心序列。包括９个弯曲ＤＮＡ,１０个Ｔ盒,５个Ａ盒结构基序以及１３个拓扑异构酶的ＩＩ的识别位点的同源序列,３４个反向重复序列,３０多个ＡＴＴＡ     

蓖麻蚕核糖体大亚基RNA基因3‘—端序列分析及进化研究

测定了蓖麻蚕核糖体大亚基ＲＮＡ编码区３’－端ＤＮＡ序列,分析了其二级结构,并与昆虫伊蚊、果蝇;线虫;脊椎动物人、小鼠、爪蟾;低等脊索动物海鞘以及真菌酵母、毛霉相应的保守区段进行了同源比较。邻接法分析表明,昆虫核糖体大亚基ＲＮＡ在进化上与５ＳｒＲＮＡ相似,有加快的趋势。