灰色链霉菌RX-17溶菌酶R2的纯化及其酶学鉴定

从灰色链霉菌 (Streptomycesgriseus)RX 1 7的发酵液中 ,通过硫酸铵分级沉淀 ,CM SephadexC 5 0和CM SepharoseFastFlow离子交换层析 ,纯化得到了溶菌酶R2 .该酶分子量约为 2 4 8kD ,等电点约为 9 7,N端 1 5个氨基酸的顺序为DTSGVQGIDVSHWQG .R2酶溶解变链球菌Ingbritt(StreptococcusmutansIngbritt)的最适作用温度为 5 5℃ ,最适pH为 7 0 .5 0℃处理 1h ,R2酶残存酶活74 % ,碱性条件 (pH >9)下该酶保持稳定 .Zn2 + 、Cu2 + 、Fe2 + 、Cd2 + 、Pb2 + 可使酶完全失活 ,螯合剂、盐酸羟胺、溴替丁二酰亚胺及离子型去垢剂SDS抑制R2酶的溶菌作用 ,而非离子型去垢剂TritonX 1 0 0等则能促进溶菌 .R2酶溶菌谱广泛 ,能够溶解多种鸡卵清溶菌酶不能作用的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 .从对金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)的高活性来看 ,该酶应分类为 β 1 ,4 N ,6 O 二乙酰胞壁质酶 (β 1 ,4 N ,6 O diacetylmuramidase) .     

链霉菌RX-17产溶细菌酶的研究

通过下磁针试验,确定了链霉菌（Streptomyces sp.)RX-17产溶细菌酶的最佳碳氮源比例即蔗糖3%,大豆蛋白胨1.25%。牛肉膏0.25%,最适培养条件的研究表明,通气量对该菌产酶十分关键,对酶的基本性质进行了研究,酶作用的最适温度和最适pH分别是60℃和6.0,在碱性范围内酶的稳定性较好,60℃1h残存酶活36.3%,溶菌活性对离子强度的变化高度敏感,溶菌谱测定显示,该酶对卵清溶菌酶不能作用的变链球菌（Streptococcus mutans),金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)有很强的溶解活性。