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杨晓洁;李江;陈静远;朱腾腾;陈雨思;仇海花;陈文杰;罗小琴;罗俊 《生理学报》2025,(1):35-46
本研究旨在明确载脂蛋白A5 (apolipoprotein A5, ApoA5)和乳脂球表皮生长因子8 (milk fat globule-epidermal growth factor 8, Mfge8)在调控心肌脂质沉积中的作用并探究二者之间的关系。对比不同人群血清中ApoA5与Mfge8含量,建立高脂饮食(high-fat diet, HFD)诱导肥胖小鼠模型,另从乳鼠提取和鉴定原代心肌细胞,加入0.8 mmol/L棕榈酸钠建立脂质沉积心肌细胞模型。转染腺病毒以过表达ApoA5并观察其对HFD诱导肥胖小鼠心脏功能和脂质影响,以及相关基因或蛋白表达变化;免疫共沉淀验证相关蛋白间的相互作用,免疫荧光染色观察相关蛋白在细胞中的定位。向心肌细胞中添加重组rMfge8以探究ApoA5对Mfge8的调控机制。结果显示:单纯肥胖组人群与健康对照组相比,血清ApoA5水平显著降低(P <0.05),Mfge8水平显著升高(P <0.05)。ApoA5显著减轻HFD肥胖小鼠体重(P <0.05)、使左心室等容舒张时间(isovolumic relaxation time, IVRT)缩短,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)增加,血浆中甘油三酯(triglycerides, TG)和胆固醇含量(P <0.05)均显著降低。ApoA5显著减少心肌组织和细胞中TG的沉积(P <0.05)、脂肪酸转位酶(fatty acid translocase, FAT/CD36)、脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein, FABP)、脂肪酸转运蛋白(fatty acid transport protein, FATP)的转录(P <0.05),以及Mfge8的蛋白表达(P <0.05),但对Mfge8的转录没有显著改变(P> 0.05)。在体外以ApoA5为诱饵蛋白捕获到了Mfge8蛋白,说明二者之间存在直接相互作用。过表达ApoA5会导致Mfge8与ApoA5或溶酶体膜相关蛋白2 (lysosomeassociated membrane protein 2, LAMP2)在脂质沉积状态下心肌细胞中的共定位增加,在此基础上外源添加重组rMfge8会抵消ApoA5对心肌细胞脂质沉积的改善作用。以上结果表明,ApoA5可通过调控Mfge8蛋白的含量和细胞定位,下调FAT/CD36等脂肪酸转运蛋白的表达,减少脂质沉积状态下心肌细胞对脂肪酸的摄取,从而显著减轻心肌脂质沉积并改善心脏舒张和收缩功能。 相似文献
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