In vivo preclinical low field MRI monitoring of tumor growth following a suicide gene therapy in an orthotopic mice model of human glioblastoma

Purpose

The aim of this study was to monitor in vivo with low field MRI growth of a murine orthotopic glioma model following a suicide gene therapy.

Methods

The gene therapy consisted in the stereotactic injection in the mice brain of a modified vaccinia virus Ankara (MVA) vector encoding for a suicide gene (FCU1) that transforms a non toxic prodrug 5-fluorocytosine (5-FC) to its highly cytotoxic derivatives 5-fluorouracil (5-FU) and 5’-fluorouridine-5’monophosphate (5’-FUMP). Using a warmed-up imaging cell, sequential 3D T1 and T2 0.1T MRI brain examinations were performed on 16 Swiss female nu/nu mice bearing orthotopic human glioblastoma (U87-MG cells). The 6-week in vivo MRI follow-up consisted in a weekly measurement of the intracerebral tumor volume leading to a total of 65 examinations. Mice were divided in four groups: sham group (n = 4), sham group treated with 5-FC only (n = 4), sham group with injection of MVA-FCU1 vector only (n = 4), therapy group administered with MVA-FCU1 vector and 5-FC (n = 4). Measurements of tumor volumes were obtained after manual segmentation of T1- and T2-weighted images.

Results

Intra-observer and inter-observer tumor volume measurements show no significant differences. No differences were found between T1 and T2 volume tumor doubling times between the three sham groups. A significant statistical difference (p < 0.05) in T1 and T2 volume tumor doubling times between the three sham groups and the animals treated with the intratumoral injection of MVA-FCU1 vector in combination with 2 weeks per os 5-FC administration was demonstrated.

Conclusion

Preclinical low field MRI was able to monitor efficacy of suicide gene therapy in delaying the tumor growth in an in vivo mouse model of orthotopic glioblastoma.     

Digoxin Suppresses Pyruvate Kinase M2-Promoted HIF-1α Transactivation in Steatohepatitis

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AAV-ITR单链DNA微载体在小鼠骨骼肌中的表达

AAV-ITR单链DNA微载体是一种基于腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)的基因表达载体(AAV-ITR ss DNA mini vector)。前期研究已证明AAV-ITR单链DNA微载体在HEK 293T细胞中具有较高的转染、表达效率。本文中将相同拷贝数的AAV-ITR单链DNA微载体、3?-ITR末端错配的AAV-ITR单链DNA微载体(AAV-ITRmm ss DNA mutant vector)、AAV-ITR双链DNA和质粒分别用Turbo Fect转入小鼠骨骼肌中,比较检测AAV-ITR单链DNA微载体与其他基因表达载体在小鼠体内1周、1个月及3个月的表达效率。组织切片经荧光显微镜观察及荧光灰度值分析表明,相同分子摩尔数的AAV-ITR单链DNA微载体比AAV-ITR双链DNA和质粒在不同时期表达效率都要高且更稳定。提取注射3个月后的肌肉组织的DNA,用荧光定量PCR分析比较各载体的存留分子数。RT-PCR的结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在注射3个月后的存留分子数较其他载体高。综合结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在动物体内具有表达效率高和长久稳定的优势,有可能开发为基因治疗的一种高效、稳定的新型载体。     

彩色多普勒超声对无水酒精治疗肝细胞癌早期疗效的评价

目的:探讨彩色多普勒超声评价无水酒精治疗肝细胞癌早期疗效的临床应用价值。方法:利用彩色多普勒血流显像(CDFI)、彩色多普勒能量图(CDE)检查技术,经皮无水酒精瘤内注射(PEI)治疗52例肝细胞癌(肿块直径1.65.0cm),疗程结束后一周,以CDFI及CDE血流显示的有无作为评价PEI早期疗效的观察指标,并行组织学活检病理检查。结果:52个肿块经PEI治疗后,CDFI及CDE示大部分肿块血流信号消失,小部分肿块能检出血流信号,但较治疗前明显减少。以病理检查结果为金标准,CDFI及CDE评价PEI治疗后肿瘤的灭活情况,其敏感性为:50.0%、77.8%,准确性为78.8%、90.4%,Kappa值为:0.486、0.779。结论:CDFI、CDE动态监控PEI治疗过程对指导治疗意义重大,CDFI、CDE评价PEI结果客观、可靠,CDE可以敏感而直观地显示PEI治疗后肿瘤周边及内部残存的血流信号,对指导PEI治疗、时机及靶目标的选择以提高疗效具有重要的临床应用价值。     

靶向吲哚菁绿纳米探针介导的光声治疗

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