内皮素受体反义寡聚核苷酸对内皮素受体基因表达及血管平滑肌细胞增殖的影响

报道了内皮素Ａ型受体反义寡聚核苷酸（ＯＤＮｓ）对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖及内皮素受体基因表达的影响．~３Ｈ－ＴｄＲ参入结果显示,内皮素Ａ型受体反义ＯＤＮｓ处理细胞可显著抑制内皮素诱导的ＶＳＭＣ的ＤＮＡ合成,反转录－ＰＣＲ及受体结合实验结果表明,ＯＤＮｓ的上述作用与降低ＶＳＭＣ内皮素Ａ型受体基因表达活性有关．     

ConA激活小鼠胸腺T淋巴细胞增殖过程中c-myc与核骨架蛋白的结合

采用DNA-蛋白质体外吸附的方法研究伴刀豆球蛋白激活小鼠胸腺T淋巴细胞增殖过程中c-myc与核骨架蛋白的结合.实验结果显示,c-myc与核骨架蛋白的结合具有特异性,在淋巴细胞激活过程中c-myc与P₃₄/P₃₆核骨架蛋白及核纤层蛋白结合,并发生动态变化.     

A血型单克隆抗体的抗原结合部位结构多样性研究

应用杂交瘤技术,以Ａ型红细胞,Ａ１血型物质ＭＳＭ（Ａ１）和Ａ－ＲＢＣ＋ＭＳＭ（Ａ１）为免疫原,制备了一组抗人Ａ血型单克隆抗体：Ａ１２１８,Ｂ５７,ＤＥ９２３－Ｇ８,Ｄ２８６－Ｅ１２经Ｔａｋａｔｓｙ微量血细胞凝集试验证明：这组单抗仅能凝集Ａ１,Ａ２及ＡＢ型红细胞,不能凝集Ｂ,Ｏ型红细胞．采用ＥＬＩＳＡ定量抑制试验法,精确测定了它们抗原结合部位的结构,互补于Ａ活性寡糖。Ａ１２１８互补于具有双岩藻糖结构的Ａ活性五糖（Ａ－Ｐｅｎｔａ）;Ｂ５７,ＤＥ９２３－Ｇ８互补于具有单岩藻糖结构的Ａ活性六糖（Ａ－Ｈｅｘａ）;而Ｄ２８６－Ｅ１２则互补于具有单岩藻糖的Ａ活性四糖（Ａ－Ｔｅｔｒａ）．结果表明：血凝特异性相同的抗Ａ单抗,其抗原结合部位的结构可呈现多样性。即Ａ活性寡糖的糖基组成数目和含有岩藻糖数目均可不相同,各种抑制剂对不同单抗的抑制作用强弱也不相同。     

紫云英根瘤菌胞外多糖合成基因exo1的序列分析

对互补紫云英根瘤菌Ｅｘｏ－Ｎｄｖ－Ｆｉｘ－变种的２．６ｋｂＤＮＡ片段进行序列测定。分析结果表明,该片段内存在一个完整的阅读框架（ＯＲＦ）ｅｘｏ１。ｅｘｏ１编码３４０个氨基酸,为细胞质蛋白。Ｅｘｏ１蛋白序列与苜蓿根瘤菌的糖基转移酶ＥｘｏＵ有较强的同源性。利用启动子检测质粒,分析ｅｘｏ１基因的表达,发现在ｅｘｏ１基因上有两个启动子活性区段,Ｐｅｘｏ１ａ位于基因前端,Ｐｅｘｏ１ｂ位于基因中间。Ｐｅｘｏ１ａ很可能包含了ｅｘｏ１基因的启动子。     

玉米醇溶贮藏蛋白基因启动子PCR扩增及其驱动GUS基因在转基因烟草种子中的表达

以玉米(Zea mays L.)黄化苗为材料,利用PCR技术扩增了玉米19kDa醇溶贮藏蛋白基因(zein)起始密码子上游启动子片段,序列分析结果表明,克隆的-1～-694片段具有19kDa zein启动子特点,与同一家族中其它基因的对应区段同源性达90％以上。将此启动子插入pPKGT的GUS基因及NOS终止子上游构成表达载体。经农杆菌转化烟草(Nicotiana tabaccum Var.samsum),得到了转化植株。转化的烟草的PCR扩增及Southern杂交证明目的片段已整合到烟草基因组中。转基因植株的GUS活性检测表明,在叶、根中无GUS活性,GUS活性只存在于种子中。转基因植株烟草种子经冷冻切片,GUS底物Xgluc活体组织染色证明GUS活性只存在一层介于种子胚乳与种皮之间的细胞中。     

脱Ca~（2＋）与结合Ca~（2＋）蝮蛇毒酸性磷脂酶A_2晶体的培养和X射线衍射数据

钙离子是磷脂酶Ａ２催化必须的铺因子,以蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２为材料,采用在晶体培养液中加入ＥＤＴＡ或ＥＧＴＡ螯合剂络合法除去ＰＬＡ２中可能有的Ｃａ＾２＋离子和加入ＣａＣｌ２以确保ＰＬＡ２能克分结合上钙离子的方法培养充分结合Ｃａ＾２＋和脱Ｃａ＾２＋的ＰＬＡ２晶体。加了螯合剂后长出的晶体为长棒状六方柱,加Ｃａ＾２＋离子后长出的晶体则为短粗的六方柱。经Ｘ射线鉴定两种晶体为同晶型,空间群为Ｐ６１,晶胞参数很     

钙离子对江浙蝮蛇蛇毒中性磷脂酶A2溶液构象的研究

用荧光光谱方法研究了钙离子对江浙蝮蛇毒中性磷脂酶Ａ２（简称ＮＰＬＡ２）构象的影响。结果表明,Ｃａ２＋能使酶中唯一的色氨酸残基的荧光增强：只有在Ｃａ２＋存在时,底物卵磷脂才明显改变酶分子中Ｔｒｐ周围的环境,使其光谱的兰移达７ｎｍ,荧光增强约一倍：酶中唯一的Ｈｉｓ残基被修饰以后,则没有上述两种现象发生;结合在ＮＰＬＡ２上的ｂｉｓＡＮＳ的荧光强度,随Ｃａ２＋浓度的增加而增强,提示Ｃａ２＋对ｂｉｓ－ＡＮＳ结合区域的构象有明显影响。     

麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A构象变化研究

为进一步验证麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白Ａ空间构象的变化,本文用傅里叶变换红外技术,定量测定了麦胚凝集素作用下,溶液血型糖蛋白Ａ和脂蛋白体膜血型糖蛋白Ａ的二级结构的改变,发现麦胚凝集素结合于血型糖蛋白Ａ导致血型糖蛋白Ａα—螺旋减少,β—结构增加,麦胚凝集素的抑制剂Ｎ—乙酰葡萄糖胺对麦胚凝集素诱导的血型糖蛋白Ａ二级结构的改变有抑制作用。本文同时用扫描隧道显微术直接观察了麦胚凝集素结合前后膜血型糖蛋白Ａ分子形态的变化。     

磷脂酶A2阻断剂对失血性休克再灌注损伤的保护作用

磷脂酶Ａ２阻断剂对失血性休克再灌注损伤的保护作用颜光涛郝秀华王录焕江潮光１田亚平２王成彬２李振甲（解放军总医院临床医学研究所,１科训处,２生化科,北京１００８５３）磷脂酶Ａ２（ＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ＰＬＡ２）激活后水解释放花生四烯酸代谢产物...     

牛磺酸调节缺氧性肺、脑血管反应的机理研究

本实验从磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）、前列腺素（ＰＧｓ）、白三烯（ＬＴｓ）和过氧化脂质（ＬＰＯ）方面探讨了牛磺酸调节肺、脑血管对急、慢性缺氧反应的机制。急性缺氧时狗出肺与出脑血中ＬＰＯ增加,ＰＬＡ,活性有升高趋势,但出脑与出肺（入脑）血相比无显著性差异。出肺与出脑血中ＬＴＣ＿４、ＴＸＢ＿２、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）及ＴＸＢ＿２／６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）比值均升高。慢性缺氧大鼠肺、脑组织中ＰＬＡ＿２活性均升高。牛磺酸增加缺氧时６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）,减弱其它变化。提示牛磺酸对缺氧性肺缩血管反应的调节作用可能与降低缺氧时ＰＬＡ＿２活性,抑制脂质过氧化和ＬＴＣ＿４、ＴＸＡ＿２生成,降低ＴＸＡ＿２／ＰＧＩ＿２比值有关;而牛磺酸减弱缺氧性脑舒血管反应不是直接通过上述变化起作用的。