分离筛选大熊猫正常生理菌—乳杆菌

本实验从１７只健康大熊猫粪便中分离出４７株待检菌,通过对其菌体形态和染色性,菌落形态,生化反应,发酵最终产物的气相色谱测定鉴定筛先出１３株乳杆菌。并测定了１３株乳杆菌对大熊猫常用抗生素的药物敏感性和对小白鼠的急性毒力实验。对大熊猫正常生理菌群微生态制剂的研制进行了初步探讨     

复方嗜酸乳杆菌片联合三联方案根除幽门螺杆菌的临床研究

目的探讨复方嗜酸乳杆菌片联合三联方案根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的疗效及不良反应。方法将143例H.pylori检测阳性的患者随机分为A1组(48例)、A2组(46例)和B组(49例)。B组给予三联方案(埃索美拉唑、阿莫西林、克拉霉素)根除H.pylori治疗,疗程10d。A1组、A2组分别在上述三联方案的基础上同时加用10d、20d的复方嗜酸乳杆菌片。治疗过程中观察并记录上述三组的不良反应发生情况,停药4周后查13 C呼气试验判别H.pylori根除是否成功。结果共133例患者完成治疗和随访,A1组、A2组、B组根除率按方案(PP)分析分别为65.9%、69.8%、63.0%,按意向性(ITT)分析分别为60.4%、65.2%、59.2%,无论按方案分析还是意向性分析三组根除率差异均无统计学意义(P0.05)。纳入三组的共143例患者均完成不良反应的随访,A1组、A2组、B组不良反应发生率分别为10.4%、8.7%、30.6%,三组相比差异有统计学意义(P0.05),其中A1组、A2组分别与B组相比差异有统计学意义(P0.05),A1组与A2组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论三联方案加用10d、20d的复方嗜酸乳杆菌片未能提高H.pylori根除率,但可降低不良反应发生率。     

乳酸杆菌对感染大肠杆菌O157:H7小鼠肠道黏膜免疫的影响

【目的】分析小鼠在感染Escherichia coli O157:H7及补充嗜酸乳杆菌KLDS AD1和瑞士乳杆菌KLDS1.8701期间小肠黏膜中SIgA和细胞因子的变化规律,结合小鼠表象特征,探讨2株乳酸杆菌对小鼠腹泻的治疗效果。【方法】将小鼠分成4组,空白组、致病对照组、嗜酸乳杆菌组和瑞士乳杆菌组,对实验组小鼠连续7 d灌胃大肠杆菌致病后,再连续7 d分别灌胃2株乳酸杆菌,采集小鼠小肠利用ELISA法测得各组小鼠肠道组织中SIgA和4种细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6的含量。【结果】瑞士乳杆菌可极显著提高感染大肠杆菌O157:H7小鼠的体重,嗜酸乳杆菌的效果较小;感染E.coli O157:H7后,SIgA、IL-2和IFN-γ的含量在第3天达到最大值,第5天开始下降,而IL-4和IL-6在第5天达到最大值,第7天开始下降。补充嗜酸乳杆菌和瑞士乳杆菌后,SIgA和4种细胞因子的含量都迅速增加,并保持较高水平,与其他两组差异显著。【结论】嗜酸乳杆菌KLDS AD1和瑞士乳杆菌KLDS 1.8701都可通过增加细胞因子和SIgA的分泌增强肠道黏膜免疫,对小鼠腹泻有一定的缓解作用。     

乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的拮抗作用

【目的】对嗜酸乳杆菌的S-层蛋白(S-layer protein)进行提纯,研究嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附和入侵的拮抗作用。【方法】应用阴离子交换柱(DE52)对嗜酸乳酸杆菌的S-层蛋白进行提纯,然后分别研究了嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的作用。【结果】S-层蛋白能显著地抑制鼠伤寒沙门氏菌的黏附及入侵;在竞争、排斥、置换3种黏附试验中,S-层蛋白可显著降低鼠伤寒沙门氏菌的黏附,其相对黏附力分别为1.17%±5.97%、8.71%±1.36%、10.56%±0.92%,差异极显著(p0.01),其中竞争试验效果最好;并且S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附抑制作用极显著高于嗜酸乳酸杆菌(p0.01);此外,S-层蛋白也能显著抑制鼠伤寒沙门氏菌入侵。【结论】乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌可产生显著的拮抗作用,这可能与S-层蛋白和鼠伤寒沙门氏菌的宿主黏附受体存在竞争作用有关;提示乳酸杆菌S-层蛋白可用于预防和治疗鼠伤寒沙门氏菌感染,并有望成为抗生素的替代品。     

植物乳杆菌Lp-2的高密度发酵

高密度培养植物乳杆菌是制作其发酵剂的重要环节。首先,研究了不同的溶氧和pH对植物乳杆菌的分批发酵的影响。在分批发酵的基础上,为进一步提高发酵液中的菌体浓度,进行了补料分批发酵实验。最终通过对蔗糖反馈补料发酵试验对比改造获得了pH反馈补料发酵工艺。此发酵补料工艺可以控制蔗糖残糖量始终处于较低的水平,因此获得了最高的菌体产量。菌体干重达到13.56g/L,较分批培养提高90.05%。     

奶牛阴道嗜酸乳杆菌生物学特性的研究

通过生长曲线、最适培养温度、最适培养方式、体外抑制奶牛子宫内膜炎常见病原菌的效果及其与奶牛子宫内膜上皮细胞黏附性等一系列实验,对1株分离自健康奶牛阴道的嗜酸乳杆菌进行生物学特性的研究。结果表明该菌最适培养温度为39℃,在偏于厌氧的环境下生长最佳,在培养18~20 h后收获最佳,对奶牛子宫内膜炎常见病原菌具有一定的抑制作用,并与奶牛子宫内膜上皮细胞具有一定的黏附作用。     

嗜酸乳杆菌产生的广谱抗菌肽AP311的分离和鉴定

分离、鉴定了乳酸菌素片生产菌嗜酸乳杆菌 (Lactobacillusacidophilus)产生的热稳定性抗菌多肽AP31 1。浓缩的AP31 1对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。AP31 1对枯草杆菌蛋白酶、凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K敏感。AP31 1的抑菌活性随pH升高而降低 ,在酸性pH(pH2～ 4)条件下可经 1 0 0℃加热 30min活性不变。正丁醇可使AP31 1沉淀 ,当沉淀溶解于pH2的酸溶液时 ,活性恢复。氯仿、甲苯、乙酸乙酯、丁酮等有机溶剂对AP31 1活性没有影响。基于AP31 1可被蛋白酶酶解 ,具有广谱的抑菌活性 ,认为这种生物活性物质是一种抗菌肽。     

早期益生菌干预联合肠内营养对重型颅脑外伤患者术后胃肠功能和认知功能的改善作用

目的探讨早期益生菌干预联合肠内营养对重型颅脑外伤患者术后胃肠功能和认知功能的改善作用。方法选择80例重型颅脑外伤患者作为研究对象,所有患者均接受手术治疗。回顾性分析患者临床资料,按照是否给予早期益生菌干预分为对照组和观察组,每组各40例。对照组患者术后给予早期肠内营养支持,观察组患者在对照组基础上联合早期益生菌(双歧杆菌乳杆菌三联活菌片)干预。应用简易智力状态检查量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价患者认知功能。比较两组患者营养状况、胃肠道不良反应、胃肠黏膜屏障功能及认知功能。结果与对照组相比,干预后观察组患者白蛋白(g/L)、前白蛋白(g/L)、血红蛋白(g/L)水平升高(34.63±4.79 vs 32.05±3.64,215.56±30.13 vs 201.57±29.47,121.51±13.08 vs 114.90±12.36),胃肠道不良反应发生率升高(37.5%vs 15.0%),D-乳酸(mmol/L)、降钙素原(μg/L)水平降低(1.31±0.38 vs 2.15±0.43,4.20±1.03 vs 6.45±1.16),MMSE评分和MoCA评分升高(24.65±2.08 vs 22.16±1.95,26.61±2.17 vs 24.35±1.83),差异有统计学意义(均P0.05)。结论早期益生菌干预联合肠内营养能够一定程度上改善重型颅脑外伤患者术后的营养状况、胃肠功能和认知功能,值得应用。     

嗜酸乳杆菌耗尽培养上清液对小鼠在体肠管运动的影响

目的研究嗜酸乳杆菌LA14菌株耗尽培养上清液(spent culture supernatant,SCS)对小鼠在体肠管运动的影响。方法昆明种小鼠50只,随机分为5组。各组分别灌胃给予SCS、活菌菌液、SCS+活菌菌液25ml/(kg.次)、硫酸阿托品注射液10 mg/(kg.次)和等容积生理盐水,每天2次,连续3 d。末次给药后1 h,各组灌胃给予印度墨汁0.2 ml/只,20 min后处死,测定小肠全长及墨汁在小肠内推进距离,计算墨汁推进率和抑制率。另取小鼠60只,随机分为6组。各组分别灌胃给予SCS、活菌菌液、SCS+活菌菌液25 ml/(kg.次)、思密达散剂1.5 g/(kg.次)或等容积生理盐水,每天2次,连续3 d。末次给药后1 h,除生理盐水组外,其余各组灌胃给予甲硫酸新斯的明注射液2 mg/kg,10 min后各组灌胃给予印度墨汁0.2 ml/只,10 min后处死,同上述方法进行测定与计算。结果在SCS组、SCS+活菌组及阿托品组,正常小鼠的墨汁推进率明显降低,与生理盐水组比较差异有非常显著性(P0.01)。给予新斯的明造模后,小鼠的肠蠕动亢进,墨汁推进率明显升高,与生理盐水组比较差异有非常显著性(P0.01),而给予SCS、活菌、SCS+活菌以及思密达后,由新斯的明所造成的小鼠小肠运动亢进受到明显抑制,小鼠墨汁推进率显著下降,与模型组比较差异有非常显著性(P0.01)。结论嗜酸乳杆菌SCS能显著抑制正常小鼠的小肠推进运动;同时SCS及活菌能明显拮抗新斯的明所致的小鼠小肠运动亢进。     

Influence of freeze-drying and spray-drying preservation methods on survivability rate of different types of protectants encapsulated Lactobacillus acidophilus FTDC 3081

ABSTRACT

The aims of this study were to compare the effectiveness of different drying methods and to investigate the effects of adding a series of individual protectant such as skim milk, sucrose, maltodextrin, and corn starch for preserving Lactobacillus acidophilus FTDC 3081 cells during spray and freeze-drying and storage at different temperatures. Results showed a remarkable high survival rate of 70–80% immediately after spray- and freeze-drying in which the cell viability retained at the range of 10⁹ to 10¹⁰ CFU/mL. After a month of storage, maltodextrin showed higher protective ability on both spray- and freeze-dried cells as compared to other protective agents at 4°C, 25°C, and 40°C. A complete loss in viability of spray-dried L. acidophilus FTDC 3081 was observed after a month at 40°C in the absence of protective agent.