平菇浸汁促进嗜酸乳杆菌生长的研究

对平菇浸汁可促进嗜酸乳杆菌的生长进行了初步研究。结果表明,平菇浸汁对嗜酸乳杆菌在还原脱脂乳中的生长具有明显的促进作用,添加5％～10％的平菇浸汁,可大大缩短嗜酸乳杆菌生长的世代时间,提高其产酸速率;在37℃下1Oh的培养,其中活菌数的含量较对照组大大提高,可达108/mL。     

植物乳杆菌Lp-2的高密度发酵

高密度培养植物乳杆菌是制作其发酵剂的重要环节。首先,研究了不同的溶氧和pH对植物乳杆菌的分批发酵的影响。在分批发酵的基础上,为进一步提高发酵液中的菌体浓度,进行了补料分批发酵实验。最终通过对蔗糖反馈补料发酵试验对比改造获得了pH反馈补料发酵工艺。此发酵补料工艺可以控制蔗糖残糖量始终处于较低的水平,因此获得了最高的菌体产量。菌体干重达到13.56g/L,较分批培养提高90.05%。     

嗜酸乳杆菌产生的广谱抗菌肽AP311的分离和鉴定

分离、鉴定了乳酸菌素片生产菌嗜酸乳杆菌 (Lactobacillusacidophilus)产生的热稳定性抗菌多肽AP31 1。浓缩的AP31 1对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。AP31 1对枯草杆菌蛋白酶、凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K敏感。AP31 1的抑菌活性随pH升高而降低 ,在酸性pH(pH2～ 4)条件下可经 1 0 0℃加热 30min活性不变。正丁醇可使AP31 1沉淀 ,当沉淀溶解于pH2的酸溶液时 ,活性恢复。氯仿、甲苯、乙酸乙酯、丁酮等有机溶剂对AP31 1活性没有影响。基于AP31 1可被蛋白酶酶解 ,具有广谱的抑菌活性 ,认为这种生物活性物质是一种抗菌肽。     

定君生联合甲硝唑治疗滴虫性阴道病的临床疗效观察

目的 通过定君生联合甲硝唑以及单独用药治疗滴虫性阴道病的临床疗效观察,探讨联合用药对滴虫性阴道病的疗效.方法 选择诊断明确的滴虫性阴道病患者150例,随机分为3组,试验组采用甲硝唑联合定君生的治疗,对照组Ⅰ采用定君生单独用药,对照组Ⅱ采用甲硝唑治疗,观察治疗后的症状、体征、滴虫和阴道的pH的变化.结果 3组患者有效率差异有统计学意义(P＜0.05),起效时间和复发率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 定君生联合甲硝唑治疗滴虫性阴道病,疗效好,有利于快速恢复阴道的微生物环境的平衡,降低复发率.     

嗜酸乳杆菌NCFM对Caco-2细胞基因表达谱的影响

摘要：【目的】嗜酸乳杆菌NCFM作为一株具有良好益生功能的模式菌株,采用基因芯片技术对其作用后的宿主细胞基因的变化情况进行分析,在生物、食品等领域具有较大研究价值。【方法】将嗜酸乳杆菌NCFM和Caco-2细胞共同培养2h,提取Caco-2细胞的总RNA,并将RNA反转录成cDNA,与Human Genome U133 Plus 2.0 Array基因表达谱芯片杂交,杂交后进行图像扫描和数据分析,并采用Real-time RT PCR方法对差异表达的基因进行验证。【结果】采用基因芯片方法检测了Caco-2细胞经嗜酸乳杆菌NCFM作用2h后的基因表达变化,发现差异表达基因为508个,其中有473个基因上调,35个基因下调,初步推测Caco-2细胞能诱导多个基因的表达,以发挥嗜酸乳杆菌NCFM的益生功能。并且经Real-time RT PCR验证,表达差异显著的3个免疫调节相关基因CCL2、PTX3和TNFRSF9的确在嗜酸乳杆菌NCFM作用期间高表达。【结论】以上这些结果促进了对嗜酸乳杆菌NCFM益生功能的认识,也为揭示该乳酸菌的作用机理提供了理论基础。     

嗜酸乳杆菌NCFM对Caco-2细胞中PTX3基因表达的影响

【目的】研究嗜酸乳杆菌NCFM对肠道上皮细胞中免疫与炎症介质因子PTX3表达的影响,并进一步揭示其调节机制。【方法】嗜酸乳杆菌NCFM与Caco-2细胞共培养0、2、4、8和12 h,提取细胞RNA,采用RealTime RT-PCR方法检测PTX3基因的表达。嗜酸乳杆菌NCFM与Caco-2细胞共培养0、0.5、1、2和4 h,提取细胞蛋白质,采用Western blot方法检测NF-κB的磷酸化水平;用NF-κB的特异性抑制剂PDTC预处理Caco-2细胞30 min,然后加入嗜酸乳杆菌NCFM作用2 h,提取细胞RNA,采用Real Time RT-PCR方法检测PTX3基因的表达。【结果】嗜酸乳杆菌NCFM与Caco-2细胞共培养后能诱导PTX3的表达,并且在共培养4 h的时候PTX3的表达量达到最大,然后逐渐下降;嗜酸乳杆菌NCFM能快速的诱导NF-κB的磷酸化,并且在加入其特异性抑制剂PDTC后,PTX3的表达显著下降。【结论】嗜酸乳杆菌NCFM作用于肠道上皮细胞后能够通过迅速激活NF-κB途径暂时性的调控PTX3的表达。     

嗜酸乳杆菌SR-1产类细菌素发酵条件及生物学特性的研究

本研究通过正交试验获得嗜酸乳杆菌sR-1分泌类细菌素的最适培养条件,即葡萄搪2％,大豆蛋白胨2．5％,酵母粉0．4％,血浆蛋白2．5％。并首次利用流加培养的方式,改进了类细菌素产生菌的发酵条件,抑菌直径从19mm提高到25mm,同时对类细菌素生物学特性进行了初步的探索。结果表明：嗜酸乳杆菌产生的类细菌素对多种蛋白酶不敏感,在低pH下能抑制革兰阴性、阳性的致病菌,在pH6．5下吸附菌体作用最强。     

Protective Effects of a Culture Supernatant of Lactobacillus acidophilus and Antioxidants on Ileal Ulcer Formation in Rats Treated with a Nonsteroidal Antiinflammatory Drug

Ileal ulcers and thiobarbituric acid (TBA)-reactive substances in the ileal mucosa were induced in rats treated with a nonsteroidal antiinflammatory drug, 5-bromo-2-(4-fluorophenyl)-3-(4-methylsulfonylphenyl)thiophene (BFMeT), at a dose of 1,000 mg/kg administered with tap water as drinking water. However, the formation of ileal ulcers and TBA-reactive substances in the ileal mucosa was repressed by giving the animals a culture supernatant of Lactobacillus acidophilus as drinking water. We measured the antioxidative activity of the culture supernatant and found that the supernatant inhibited the formation of t-butyl hydroperoxide-induced TBA-reactive substances in erythrocyte membrane ghosts. Therefore, the effects of various known antioxidative compounds on the ileal ulcer formation induced by BFMeT were investigated. While α-tocopherol, t-butyl-1,4-hydroxyanisole and allopurinol did not repress ulcer formation after BFMeT treatment, ascorbic acid, dimethyl sulfoxide, glutathione and β-carotene significantly inhibited formation. Among these compounds, ascorbic acid was the most effective. Accumulation of TBA-reactive substances in the ileal mucosa after BFMeT treatment also decreased significantly in rats treated with ascorbic acid. In addition, the percentage of Gram-negative rods in the ileal contents of rats treated with BFMeT and tap water was dramatically increased, but it was not increased in rats treated with BFMeT and these antioxidants. A positive correlation between the percentage of Gram-negative rods and the number of ileal ulcers was also observed. These results suggest that lipid peroxidation mediated by oxygen radicals plays an important role in the induction of ileal ulcers by BFMeT in rats, and that lipopolysaccharide-activated neutrophils probably produce highly reactive hypochlorous acid and hydrogen peroxide, which are inactivated by ascorbic acid and glutathione, respectively.     

复方嗜酸乳杆菌联合小麦纤维素治疗肝性脑病的疗效观察

目的 观察复方嗜酸乳杆菌联合小麦纤维素治疗肝性脑病的临床疗效.方法 将48例肝性脑病患者随机分成A、B两组,A组24例在常规综合治疗的基础上给予复方嗜酸乳杆菌联合小麦纤维素治疗,B组24例在常规综合治疗的基础上仅给予小麦纤维素治疗,观察两组数字连接试验,数字符号试验,血氨及肝功能的变化,数据采用统计学方法分析.结果 与B组比较,A组数字连接实验(NCT)的缩短、数字符号试验(DST)评分的增加及血氨含量下降明显,差异有统计学意义(P＜0.01),A组肝功能改善亦明显(P＜0.05).结论 在常规综合治疗的前提下,复方嗜酸乳杆菌联合小麦纤维素治疗肝性脑病的疗效优于单用小麦纤维素,有利于患者症状的缓解、血氨的下降及肝功能的保护.     

酸奶发酵过程中抗生素对酸度的影响

建立7种抗生素对发酵产酸奶的酸度影响。用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌按1∶1菌浓度比来发酵牛奶,NaOH滴定其酸度。结果表明:头孢噻呋钠、青霉素G钾盐、硫酸链霉素、盐酸土霉素、硫氰酸红霉素对发酵生产酸奶的临界质量浓度点分别为0.012 5、0.25、30、0.125和2.5 mg/L;硫酸庆大霉素和磺胺嘧啶的临界质量浓度点高于200 mg/L;抗生素的浓度低于临界浓度点,酸奶的酸度在80°T到100°T之间。实验证明:在酸奶发酵过程中加入抗生素对酸奶酸度的变化趋势稳定,利用酸度来判断抗生素的浓度具有可操作性。