Proteomic analysis reveals tanshinone IIA enhances apoptosis of advanced cervix carcinoma CaSki cells through mitochondria intrinsic and endoplasmic reticulum stress pathways

Cervix cancer is the second most common cancer among women worldwide, whereas paclitaxel, the first line chemotherapeutic drug used to treat cervical cancer, shows low chemosensitivity on the advanced cervical cancer cell line. Tanshinone IIA (Tan IIA) exhibited strong growth inhibitory effect on CaSki cells (IC₅₀ = 5.51 μM) through promoting caspase cascades with concomitant upregulating the phosphorylation of p38 and JNK signaling. Comprehensive proteomics revealed the global protein changes and the network analysis implied that Tan IIA treatment would activate ER stress pathways that finally lead to apoptotic cell death. Moreover, ER stress inhibitor could alleviate Tan IIA caused cell growth inhibition and ameliorate C/EBP‐homologous protein as well as apoptosis signal‐regulating kinase 1 mediated cell death. The therapeutic interventions targeting the mitochondrial‐related apoptosis and ER stress responses might be promising strategies to conquer paclitaxel resistance.     

支气管动脉灌注化疗与栓塞治疗中晚期肺癌的疗效观察

目的：对比分析支气管动脉灌注化疗与支气管动脉灌注化疗十栓塞术治疗中晚期肺癌的临床疗效。方法：将我院2011年1月-2013年1月期间收治的76例中晚期肺癌患者随机分为两组,即观察组38例,对照组38例。观察组患者行支气管动脉灌注化疗联合栓塞术治疗,对照组患者行单纯支气管动脉灌注化疗治疗。分别对两组患者治疗后的临床治疗效果进行评价,同时观察两组患者治疗后的不良反应及并发症的发生情况。结果：观察组患者临床治疗的总有效率为84．21％,对照组为64．78％．两组比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）。两组患者治疗后,观察组患者总不良反应率为23．67％,对照组为21．04％,两组比较．差异无统计学意义（P〉0．05）。且经对症处理后,均得到有效改善。结论：支气管动脉灌注化疗联合栓塞术治疗中晚期肺癌的,临床疗效明显优于单纯支气管动脉灌注化疗,且无明显不良反应及并发症的发生,安全性好,值得临床推广与应用。     

姜黄素诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的机制研究

目的：胰腺癌恶性程度高、进展快、预后差,姜黄素对于抑制恶性肿瘤的发生和进程具有广泛的生物学效应。但姜黄素能否诱导人胰腺癌细胞凋亡,其具体作用机制如何？目前仍无报道。本研究拟观察姜黄素对人胰腺癌PANC．1细胞凋亡的影响,探讨姜黄素诱导PANC．1细胞凋亡的机制。方法：不同浓度姜黄素处理人胰腺癌PANC-1细胞,流式细胞仪检测PANC-1细胞凋亡率,并分析Caspase-9和Caspase-3活性的变化,同时通过RT—PCR和Westemblot分析PANC-1细胞中P53表达的变化。结果：PANC-1细胞经不同浓度的姜黄素处理后,可以显著诱导细胞凋亡,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素具有一定抗肿瘤活性。姜黄素能够同时增加Caspase-9和Caspase-3的活性,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素可能通过Caspase-9和Caspase-3途径来诱导PANC．1细胞凋亡的发生。RT—PCR和westernblot结果显示,姜黄素可以显著增加PANC-1细胞中P53蛋白表达水平。结论：姜黄素可以显著诱导PANC-1细胞凋亡的发生,提高Caspase-9和Caspase-3的活性,同时增加的P53表达,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素诱导PANC-1细胞凋亡的过程可能与增加细胞中Caspase-9,Caspase-3以及P53的表达有关。本研究探讨了姜黄素诱导PANC-1细胞凋亡的分子机制,为姜黄素的进一步应用提供了新的思路和理论支持,在人胰腺癌的临床治疗中具有一定的潜在应用价值。     

卡介苗作用大鼠膀胱肿瘤细胞／正常移行上皮细胞后TNF—α．、IL-10、IFN-γ的检测及意义

目的：观察卡介苗（BCG）单独作用膀胱肿瘤细胞、正常膀胱移行上皮细胞及其代谢产物作用上述细胞后细胞生长情况及各自细胞培养液上清液中细胞因子（TNF-α．、IL-10、IFN-γ）浓度的变化,探讨其在卡介苗治疗膀胱肿瘤中可能的作用机制。方法：构建大鼠膀胱肿瘤模型,并原代培养大鼠膀胱肿瘤细胞及正常膀胱移行上皮细胞。分别用BCG,普通培养液和细胞培养的代谢产物作用上述细胞。酶联接免疫吸附剂测定法（ELISA法）检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）、干扰素-γ（IFN-γ）的浓度。结果：ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-10的浓度改变有显著差异,而IFN-γ的浓度无显著差异。结论：BCG可以直接刺激肿瘤细胞自身分泌细胞因子（TNF-α、IL-10）参与调节抑制肿瘤细胞的生长。     

SIRT1在宫颈癌细胞耐药中的作用及其机制研究

摘要目的：探讨沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1（silentmatingtypeinformationregulation2homologyl,SIRTl）在宫颈癌化疗耐药中的作用及其机制。方法：体外培养人宫颈癌Hela细胞系和宫颈癌Hela／MMC耐药细胞亚系,westernblotting检测MMC对Hela和Hela／MMC细胞内SIRTl蛋白表达的影响;MTT法检测MMC及Nicotinamide对Hela和Hela／MMC细胞增殖的影响;AnnexinV-PI试验检测Hela／MMC细胞凋亡的亡的情况;RT—PCR方法检测耐药相关蛋白P—gP的mRNA表达情况。结果：正常情况下,Hela／MMC细胞中SIRTl的表达显著高于Hela细胞（P〈0．05）,MMC处理的Hela／MMC细胞中SIRTl的表达显著高于未经MMC处理（P〈0．05）。Nicotinamide对Hela和Hela／MMC细胞具有相似的生长抑制作用,Nicotinamide可使MMC诱导的Hela／MMC细胞凋亡增加,同时降低细胞内P-gP的mRNA表达（P〈0．05）。结论：SIRTl表达下调能显著减轻Hela／MMC细胞对MMC的耐药性,其作用可能与P—gp有关。     

转铁蛋白修饰脂质体的制备及其肝癌靶向性研究

目的：肿瘤的靶向治疗是当前研究的热点,肝肿瘤细胞表面有大量的转铁蛋白受体表达,而正常组织较少,因此本研究制备转铁蛋白（TF）修饰的脂质体（TFLPs）,并对其肝肿瘤靶向性进行研究。方法：采用薄膜分散法制备普通脂质体,考察其形态,粒径,电位。通过体外血清稳定性模拟脂质体进入体内后的稳定性。通过HepG2肿瘤细胞对TFLPs的摄取实验考查脂质体与肝癌细胞的亲和力。构建荷瘤裸鼠模型,考查TFLPs在荷瘤裸鼠体内的分布。结果：所制备的TFLPs平均粒径为108．8±9．5nm,Zeta电位为．1．80±0．73mV。学期稳定性试验结果显示,TFLPs在24h内具有良好的血清稳定性。体外细胞摄取实验表明,HepG2细胞对TFLPs的摄取效率是普通长循环脂质体（LPs）的3．4倍。荷瘤裸鼠肝组织和肿瘤组织切片结果显示,TFLPs比LPs具有更好的肿瘤靶向性。结论：该脂质体制备方法简单,与LPs相比,经转铁蛋白修饰可显著提高肿瘤细胞对脂质体的摄取,TFLPs是一种潜在高效的肝癌靶向给药系统。     

探寻肝再生磷酸酶3在膀胱癌细胞T24中的作用

目的：已经有研究证明肝再生磷酸酶3（PhosphataseofRegeneratingLiver-3,PRL-3）在消化道肿瘤的发生发展过程中起到重要作用,但其在膀胱癌中发挥何种作用尚不清楚,本次研究主要探寻PRL-3在膀胱癌细胞T24中作用,以求为膀胱癌的治疗提供新思路。方法：采用siRNA干涉的方法下调T24中PRL-3蛋白表达水平,通过westernblot方法检测干涉效果,绘制细胞生长曲线、构建裸鼠种植瘤模型,检测PRL-3下调对细胞体外及体内增殖的影响。结果：我们所设计的siRNA能够下调PRL-3在A498细胞中的表达（F=7．26,P〈0．05）,细胞生长曲线显示下调PRL-3能够抑制细胞的增殖,这种作用从干涉后的第60h开始,随时间增加作用愈加明显（F≥8．35,P〈0．05）;动物实验表明,siRNA下调PRL-3能够抑制T24细胞在活体内的增殖,从干涉后第21天开始这种作用开始体现出来（F≥10．46,P〈0．05）,并且干涉组的肿瘤肿瘤明显低于两个对照组（F=13．63,P〈0．05）。结论：我们构建的siRNA能够在T24细胞中实现对PRL．3蛋白的下调,siRNA介导的PRL-3蛋白下调能够明显抑制T24细胞在活体外及活体内的增殖,这初步证明PRL-3在膀胱癌中发挥重要的作用。随着我们对PRL-3分子进一步深入的了解,揭示其发挥作用的具体机制,PRL-3很可能成为膀胱癌基因治疗的新靶点。     

Reglα蛋白表达在胃癌及癌前病变组织中的变化

目的：观察再生基因1α（Regeneration gene 1α,Regla）在胃癌前病变组织及胃癌组织中的表达变化,探讨Reglot在胃粘膜癌变中发挥的作用,为临床诊治提供理论基础。方法：收集2011年1月-2012年12月在我院接受胃镜活检的患者胃粘膜组织,病理确诊为浅表性胃炎的为正常组,中度以上萎缩及肠化的为癌前病变组及胃腺癌即胃癌组。采用荧光定量PCR的方法检测三组胃粘膜组织中Regla的mRNA表达情况。结果：Reglet的mRNA表达在正常组、癌变组及胃癌组织中呈进行性升高;胃癌组中,低分化及印戒细胞癌和Ⅳ期胃癌患者的Reg1α表达升高最为明显;Regla在不同分化程度的胃癌组织间表达无显著差异;Regla在Ⅳ期胃癌中的表达显著高于I／II期;差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：作为一种生长因子Regla可能参与了胃粘膜癌变的过程,并且Reglet的高表达可能与胃癌的预后相关。     

Interplay between apoptotic and autophagy pathways after exposure to cerium dioxide nanoparticles in human monocytes

Engineered nanomaterials, defined as having at least one dimension smaller than 100 nm, have revolutionized many technology sectors ranging from therapeutics and diagnostics to environmental monitoring and remediation. This has resulted in a rapid increase in their manufacture over the past few years, accompanied by an increased human exposure potential. However, understanding of the interactions of nanomaterials with biological systems is still rudimentary. We have described that an environmentally and medically relevant nano metal (cerium dioxide) can affect primary human monocyte viability and interact with programmed cell death pathways leading to apoptosis and autophagic cell death. Cerium dioxide nanoparticles (CeO₂ NPs)-induced autophagy acts as a prodeath mechanism and leads to increased cytotoxicity of human monocytes. A better understanding of the implication and biological significance of CeO₂ NPs-induced autophagy and apoptosis will help us understand the risks associated with its uses and develop safer nanomedicine.