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71.
72.
以野生型O+purG+和组成型OC purG+为材料,通过体内克隆获得了初级克隆pLBG-1(O+)和pLBG-2(OC),并对它们进行了亚克隆,得到可直接测定其5’调控区序列的亚克隆pLB1933(O+)和pLB1927(OC).测序结果表明,OC突变发生在purG5’端调控区的16bp PUR box上,使第3位的G变成了A.调节蛋白与PURbox的结合分析表明,调节蛋白能上O+purG+的PUR box结合,而不能和O+purG+的PUR box结合.这有力地证明了PUR box是调节蛋白的结合区,而PUR box的第3碱基是相对保守的,它的改变将直接导致PUR box功能的丧失. 相似文献
73.
外源基因导入黄瓜获得突变新品系 总被引:9,自引:0,他引:9
74.
鼠伤寒沙站氏菌嘌呤生物合成调控研究 总被引:4,自引:1,他引:3
在鼠伤寒沙门氏菌中,由嘌呤从头合成途径合成IMP经10步酶促反应,涉及10个结构基因,其中PurJ purH和purD构成1个操纵子,除purB外均肥反式调节基因purR的负调控。本文以purJHDO^+和O^c突变体为材料,通过体内克隆法分别克隆到O^+purJHK(P2-9)和O^cpurJHD(P^c-12)操纵子;遗传互补和限制性内切酶分析作出了P2-9和P^c-12的物理谱。经2次亚克克 相似文献
77.
[目的]探究毒力基因aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株致病作用的相关性.[方法]利用Red同源重组方法,构建APEC E058株aerobactin与sit操纵子基因缺失株E058Δvir,并通过一系列的体内及体外试验对其生物学特性进行研究.[结果]生长曲线测定、细菌侵袭试验及体外竞争等试验结果表明,突变株与亲本株差异不显著;体内动态分布试验结果显示,突变株E058Δvir在5个被检脏器中均极显著地低于亲本株(P<0.001).[结论]aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株的致病性相关,是其重要的致病因子. 相似文献
78.
pBR322-Red是一种新型重组工程系统,它携带了λ-噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件.对pBR322-Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能,在菌株W3110体内,对染色体上的lac操纵子进行了基因修饰,包括:①运用kan/sacB选择反选择方法和重叠引物方法敲除了阻遏基因lacⅠ,②运用kan/sacB选择反选择方法和线性双链DNA介导的DNA重组方法将报告基因lacZ敲入lacA和lacY的位置,并且首次测定了报告基因lacZ在这三个结构基因位置的组成性表达情况.结果表明运用不同的重组策略,pBR322-Red系统都能方便有效地对大肠杆菌W3110染色体进行基因敲除和敲入修饰. 相似文献
79.
关于色氨酸操纵子,在杨颐康先生主编的《微生物学》一书中是这样叙述的:“在色氨酸操纵子里,由调节基因产生的调节蛋白,本来不具阻遏蛋白活性,但与色氨酸结合后,由于构象变化,就具有与DNA的亲和力,而结合在DNA上,这样就使结构基因关闭,不可能产生色氨酸”。又如《基础微生物学专题选》(复旦大学“基础微生物学专题选”编写组)一书中用 相似文献
80.
运用PCR方法,从磷酸乙酰转移酶(Pta)-乙酸激酶(Ack)代谢途径缺失菌株E.coliPA1染色体上,扩增出天氨酸激酶-1-高丝氨酸脱氢酶-I(thrA)和高丝氨酸激酶(thrB)基因部分序列,构建了整合型重组质粒pVHb-Kan;应用染色体-质粒同源重组的方法,将透明颤菌血红蛋白(Vitreoscila haemoglobin,VHb)基因整合到大杆菌PA1染色体上的thr操纵子,构建了新型整合工程菌G830。在高密度发酵条件下,G830的细胞呼吸强度、能量代谢、最高菌密度和细胞干重,均明显优于对照菌株PA1和BL21;重组蛋白脯氨酰内肽酶在G830和PA1中获得稳定高表达;重组菌生长状况及发酵指标均与空宿主菌基本一致且表达质粒能维持较好的稳定性。整合型vhb的表达及乙酸代谢途径(Pta-Ack)的缺陷,改善了宿主在贫氧条件下的生长,且促进了重组蛋白的表达。该工程菌具有良好的氧耐受力,且乙酸积累得到大幅度降低,可作为适于高密度发酵的基因工程菌。 相似文献